革兰阴性杆菌分离培养基——其它革兰阴性杆菌用培养基

缓冲活性炭酵母琼脂培养基（BCYE )

[用途]

用于嗜肺军团菌的分离培养

[配法]

酵母浸液10g ，活性（NoritSG ) 2g , L-半胱氨酸盐酸盐0.4g ，可溶性焦磷酸铁盐0.25g，琼脂17g , N-2- 乙酰氨基-乙氨基乙醇磺酸（ACES ) 10g，蒸馏水80ml。

上述成分除半肤氨酸及焦磷酸铁外，其余成分混合加热溶解，经121 ℃ 15min灭菌，放水浴中冷却到50 ℃ 。另外分别配新鲜L- 半胱氨酸溶液（10ml蒸馏水中含0.4g）及焦磷酸铁溶液（10ml含0.25g ) ，分别过滤除菌，再加入已灭菌琼脂中，加入1mol／L 氢氧化钾溶液4-5ml使培养基的最终pH 为6.9 -7.0 ，可用1mol／L 盐酸溶液校正，倾注平板，冷却后置4 ℃ 冰箱备用，亦可制成斜面，用于保存菌种。该培养基为黑色。

[用法]

液体标本可直接接种培养基，肺、肝、脾等固体标本须制成100g / L 悬液后再接种培养基，接种后的培养基置35 ℃ 需氧环境培养，培养箱需保持一定的湿度。每天用解剖镜检查平板培养物，用略大于10⁰ 角的斜射光源照明。在BCYE 平板上，培养4-5 天，菌落直径约1-2mm，并出现亮蓝和切削玻璃样的构造；继续培养后菌落增大呈黄绿色，较光滑。

[保存]

在室温、暗室中可保存1 周

2 弯曲菌选择性培养基

( l ) Skirrow 's 培养基

［用途］

用于空弯及幽门螺杆菌分离培养

[配法]

蛋白胨5g，胰蛋白胨5g，酵母膏5g，氯化钠5g，琼脂粉12g ，万古霉素10ml ，多粘菌素B 2500U , TMP5mg脱纤维羊血70ml ，蒸馏水930mL

除血和抗生素外，其余成分混合于水中，加热溶解，调pH 至7.2 , 121 ℃ 灭菌15min 待冷至50℃ 时加入羊血7ml和多抗液0.5ml，摇匀，倾注无菌平板。

[用法]

将标本接种平板，置25 ℃ 或43 ℃ 微需氧环境中培养48h ，菌落直径达1-2mm ，为不溶血的菌落

[质量控制]

大肠埃希菌ATCC 25922和粪肠球菌ATCC 33186 不生长；空肠弯曲菌胎儿亚种ATCC 29424 生长良好。

注：

l ）多抗液的配制：① 乳酸62mg （约2 滴）加入100ml 灭菌水中，然后加入TMP100mg ，混合加热100 ℃ 灭菌。② 取① 液5ml ，再加万古霉素100mg 和多粘菌素B 0.38mg ，摇匀后即可

2 ）弯曲菌属系微需氧菌，培养时可提供5 ％氧气及10 ％二氧化碳。高浓度氧不利于细菌生长，尤其是幽门螺杆菌。因此标本采集后，应尽决接种培养，或置运送培养基中运送

3 ）弯曲菌运送可用布氏菌汤培养基

( 2 ) Campy -BAP 培养基

[用途]

用于分离培养弯曲菌。

[配法]

蛋白胨10g ，胰胨10g ，葡萄糖10g ，酵母浸膏3g ，氯化钠5g，重亚硫酸钠0.1g ，蒸馏水900ml ，脱纤维羊血100ml ，万古霉素10mg ，多粘菌素B 2500U, TMP 5mg ，两性霉素B 2mg

将上述成分（除羊血和抗菌补充剂外），加入900ml 蒸馏水，加热溶解，调pH 至7.2 后分装，121 ℃ 灭菌15min ，加入羊血和抗菌药物添加剂，充分混匀后倾注于无菌平皿内。

[用法]

取标本接种于平板，置25 ℃ 或43 ℃ 微需氧环境中培养48h ，菌落直径达1-2 mm ，不溶血

[质量控制]

大肠埃希菌ATCC 25922 不生长；粪肠球菌ATCC 33186 不生长；空肠弯曲菌胎儿亚种ATCC 29424 生长良好

上一篇：革兰阴性杆菌分离培养基——非发酵细菌用培养基

下一篇：生化试验培养基——糖发酵试验培养基