碳源和氮源利用试验培养基

[用途]

用于无动力不产气不发酵乳糖的大肠埃希菌与志贺菌属的鉴别。前者多数为阳性，后者均为阴性

[配法]

蛋白胨10g ，粘液酸10g，蒸馏水1L , 2g / L 溴麝香草酚蓝溶液12ml

将上述成分混合溶解，校正pH 为7.4 。分装试管，每管约3-4ml ，经121 ℃ 灭菌15min , 4 ℃ 冷存备用

[用法]

取试验菌株18-24h 肉汤培养物1 环接种培养基。35 ℃ 孵育1-2 周，每天观察结果。培养基呈黄色为阳性表明细菌能利用粘液酸盐；若培养基不变色则为阴性

[质量控制]

大肠埃希菌ATCC 25922 阳性；痢疾志贺I 型ATCC 13313阴性

2 丙二酸盐试验培养基

[用途]

主要用于下述菌属的鉴定：阳性菌有粪产碱杆菌、亚利桑那菌、克雷伯菌；阴性菌有不动杆菌属、沙门菌属、放线菌属；特别是枸椽酸杆菌，用于属内种的鉴定如弗劳地、异型枸椽酸杆菌呈阳性，而丙二酸盐阴性构椽酸杆菌呈阴性。

[配法]

酵母浸膏1g ，硫酸铵2g ，磷酸氢二钾0.6g，磷酸二氢钾0.4g，氯化钠2g ，丙二酸钠3g ，葡萄糖0.25g， 溴麝香草酚蓝0.025g，蒸馏水1L

将上述成分溶解后调pH 至6.7，分装小试管，每管3ml，121 ℃ 灭菌15min，冷却后置冰箱保存。

取纯培养物接种培养基中，35 ℃ 孵育24-48h 。培养基由绿色变蓝色为阳性，培养基为绿色或黄色（仅葡萄糖发酵产酸）为阴性。应观察48h 方可报告。

[质量控制]

肺炎克雷伯菌ATCC 27236阳性；丙二酸盐阴性杆菌阴性。

[保存]

置4 ℃ 冰箱，1 周内用完。

3 醋酸盐试验培养基

[用途]

用于肠杆菌科的鉴定

[配法]

醋酸盐2g ，氯化钠5g，硫酸镁2g/ L ，磷酸氢铵1g ，磷酸氢二钾1g ，琼脂20g，蒸馏水1L

 将上述成分加热溶解，校正pH 至6.8，然后加2g / L 溴麝香草酚蓝溶液12 ml，121 ℃ 灭菌15min ，制成斜面备用

[用法]

将试验菌接种到斜面上，35 ℃ 培养7d ，每天观察1 次。培养基由绿色变为蓝色为阳性

[质量控制]

大肠埃希菌（ATCC 25922 ）阳性；宋内氏志贺菌（ATCC 11060）阴性。

[保存]

置4 ℃ 冰箱，2 周内用完

注：

(1)试验菌株要新鲜。

(2)   阴性菌要观察至第7天，方可报告。

4 葡萄糖酸盐试验培养基

[用途]

帮助属间鉴别、种间鉴别和沙雷菌属菌种的鉴定。

[配法]

蛋白胨1.5g，磷酸氢二钾1g ，酵母浸膏1g ，葡萄糖酸钾40g ，或葡萄糖酸钠37.25g，蒸馏水1L。

将上述成分加热溶解，调pH 至7.0 ，然后分装试管，每管2ml，115 ℃ 灭菌15min ，冷却备用。取待检菌大量接种培养基，35 ℃ 培养24-48h ，加斑氏试剂1ml，充分混匀，隔水加热煮沸10min ，观察结果。产生黄-橙色沉淀为阳性，蓝色沉淀为阴性
[质量控制]

肺炎克雷伯菌ATCC 27236阳性；大肠埃希菌ATCC 25922 阴性。

5 枸椽酸盐试验培养基

［用途］

鉴定细菌对枸椽酸盐及无机铵的利用能力。

［配法1 ( Simmons ) ]

硫酸镁0.2g ，磷酸二氢铵1g ，磷酸氢二钾1g ，枸椽酸钠5g，琼脂20g ，氯化钠5g，2g / L 溴麝香草酚蓝溶液40ml ，蒸馏水1L ( pH 6.8 ）。

［配法2 ( Christensen ) ]

枸椽酸钠3g ，葡萄糖0.2g ，酵母浸膏0.5g，盐酸半肤氨酸0.1g ，枸椽酸铁铵0.4g ，磷酸氢二钾1g ，硫代硫酸钠0.08g ，氯化钠5g，酚红0.012g ，琼脂5g，蒸馏水1L（pH6.9 )

先将盐类溶解于水内，调整pH ，再加入琼脂，加热溶化后，加入指示剂，混合均匀后分装试管，高压灭菌121℃ 15min ，放成斜面。将待检菌浓密地划线接种在上述斜面上，于35 ℃ 培养1-4 天，逐日观察结果。

Simmons（西蒙）枸椽酸盐培养基斜面上有细菌生长，培养基由绿变成蓝色为阳性，无细菌生长，颜色不变蓝色为阴性；Christinsen （柯氏）枸椽酸盐培养基斜面呈红色为阳性，颜色不变为阴性。

［保存］

置4 ℃ 冰箱，2 周内用完

[质量控制]

肺炎克雷伯菌阳性；大肠埃希菌ATCC 25922 阴性

注：

（1）当挑取同一培养物接种一组生化试验管时，在接种枸椽酸盐培养基前，接种针或环要用火焰灭菌，或先接种枸椽酸盐培养基。因培养基上若存在葡萄糖或其它营养物质可导致假阳性。

（2）接种时菌量应适宜，过少可导致假阴性结果，接种物过量可导致假阳性结果。

（3）通常培养24h 观察结果，但有些枸椽酸盐阳性的细菌则需孵育48h 以上，才能使培养基的pH 变化。

6 碳源利用试验培养基

[用途]

测定细菌利用碳源的能力

[配法]

磷酸氢二铵0.5g，磷酸二氢钾1.3g ，磷酸氢二钠3.2g，硫酸钠0.8g ，硝酸钠1g ，待测物质2-10g，蒸馏水1L 。

将各成分溶于水中，校正pH 7.2 ，分装，116 ℃ 灭菌15min。

[用法]

将待试菌制成低浓度的9g / L 氯化钠溶液菌悬液，接种培养基，于适当的温度下培养24-48h 。若有细菌生长即为阳性，反之为阴性。

[质量控制]

菌液不可太浓，否则结果不易观察。应设已知菌阴性、阳性对照。可用多种细菌试验同一含碳化合物，亦可用多种含碳化合物试验同一种细菌。

注：

（1）    使用的含碳化合物主要为各种糖类和有机酸类

（2）不能用一支培养管做多项试验

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