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真菌培养基



录入时间:2010-8-18 10:55:31 来源:青岛海博

一、沙保罗琼脂培养基

[用途]

供真菌及酵母样真菌的分离培养用

[配法]

麦芽糖40g ,蛋白胨10g ,琼脂20g ,蒸馏水1L

将上述成分溶于水,加热溶解,调pH 6.0 0.2 ,分装三角瓶或试管中,118 灭菌15min ,倾注平板或置斜面,无菌试验后备用

[用法]

将标本接种培养基,如系血液标本,则采取1-2ml,与冷却至45 左右沙保琼脂混合,倾注接种平板。分别置35 25 恒温箱内同时培养。35 培养48h , 25 需连续培养5 天,逐日观察结果。发现真菌及酵母样可疑菌落,转种沙保菌斜面,获得纯培养后进行鉴定。

[质量控制]

白色念珠菌和新型隐球菌生长良好。

注:

(1)    本培养基如不加入琼脂,即为沙保罗液体培养基,供真菌及念珠菌的增菌培养用。

(2)    增加氯霉素0.05-0.125mgml或放线菌酮0.5mgml,可抑制细菌和污染的霉菌及隐球菌生长。此二种药均耐热,可直接加入培养基内高压灭菌。

(3)    添加酵母浸膏5mgml,可促进皮肤癣菌生长。增加维生素B 0.1mgml,可促进紫色癣菌和断发癣菌生长

(4)    将麦芽糖减少到20g / L ,为沙保罗20g / L 麦芽糖琼脂培养基,可供诱导真菌产生孢子用

(5)    该培养基呈酸性,应提高20%的琼脂用量。

二、玉米粉琼脂培养基

[用途]

鉴定酵母样真菌用。白色念珠菌在该培养基上25 24h 培养可长出假菌丝,顶端有典型的厚壁孢子,可与其它念珠菌鉴别。

[配法]

玉米粉4g ,琼脂粉8g ,蒸馏水1L( pH6.0 0.2 )。

将细米粉加水浸泡数分钟,扎紧瓶口,浸入60 水浴4h ,取出后用沙布过滤,除去粗渣,补足水分。无须调整pH 。加入琼脂,煮沸溶解,有沉淀物再过滤1 次,分装试管,121 灭菌15min 备用。

用玻璃片法点种后,置平皿内,保持一定湿度,置23-26 下培养24-48h 。取出玻片培养物,用高倍镜观察真假菌丝和有无厚壁孢子。

[质量控制]

白色念珠菌(ATCC 26790)厚膜孢子阳性;新型隐球菌(ATCC 9763)厚膜孢子阴性

注:

(1)    玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉代替,效果相同。

(2)    该培养基加入10 mlL Tween-80 ,制成玉米粉Tween-80 琼脂,用途相同,效果更好

 

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