《水生微生物实验法》——从沉积物中分离霉菌

在海洋中霉菌比放线菌多，但比细菌少．霉菌分布在近岸海水、海泥及海藻休上．多数是陆上常见的霉菌．也有引起鱼类疾病的水霉目血鳃霉、肤鳃霉和绵霉，是水中分解动植物残体的常见霉菌

1 ．培养基成分及其制备

（1）麦芽汁是酿造啤酒前未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，可向啤酒厂购买，也可自制。取麦芽粉1公斤加水3 升，在60℃ 下保温，使其糖化至无淀粉反应（检查方法：取糖化液0.5毫升．加碘液2 滴，如无蓝色出现即糖化完全）为止．过滤，加2-3 个鸡蛋清（有助于麦芽汁澄清）、拌匀．煮沸，再过滤．则得麦芽汁。加自来水（或海水）稀释至10-15 波美，调pH4.2 ，如制成固体培养基则加2%琼脂，分装烧瓶中．121℃ 蒸汽下灭菌15 分钟。制成平板或斜面，可培养霉菌或酵母菌。

（2）麦芽汁培养基：

麦芽膏20克

琼脂20 克

陈海水或自来水1000毫升

将各成分溶解于水中，用氢氧化钠溶液调pH 至6.5 ，分装，121 ℃ 蒸汽下灭菌20 分钟。制成平板或斜面，待用。

（3）麦芽汁葡萄糖琼脂：

麦芽膏20 克

葡萄糖20 克

蛋白胨l 克．

琼脂20克

陈海水或蒸馏水1000毫升

将各成分溶解于水后，分装，112℃ 蒸汽下灭菌15 分钟．制成平板或斜面．

2 ．分离步骤

（1）按10倍稀释法将样品制成合适的稀释液（10^-2、10^-3、10^-4）。

（2）各取0.1毫升稀释液于加数滴80%乳酸的麦芽葡萄糖琼脂平板培养基上，用无菌弯曲玻棒涂匀．每个稀释度制2 个培养皿。

（3）倒置培养皿于25-30 ℃ 下培养3-4 天．

（4）观察菌落特征，挑取所需菌落接种于斜面培养基上．

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