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《水生微生物实验法》——从沉积物中分离霉菌



录入时间:2010-9-13 13:56:04 来源:青岛海博

 

在海洋中霉菌比放线菌多,但比细菌少.霉菌分布在近岸海水、海泥及海藻休上.多数是陆上常见的霉菌.也有引起鱼类疾病的水霉目血鳃霉、肤鳃霉和绵霉,是水中分解动植物残体的常见霉菌

1 .培养基成分及其制备

1)麦芽汁是酿造啤酒前未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,可向啤酒厂购买,也可自制。取麦芽粉1公斤加水3 ,在60 下保温,使其糖化至无淀粉反应(检查方法:取糖化液0.5毫升.加碘液2 滴,如无蓝色出现即糖化完全)为止.过滤,加2-3 个鸡蛋清(有助于麦芽汁澄清)、拌匀.煮沸,再过滤.则得麦芽汁。加自来水(或海水)稀释至10-15 波美,调pH4.2 ,如制成固体培养基则加2%琼脂,分装烧瓶中.121 蒸汽下灭菌15 分钟。制成平板或斜面,可培养霉菌或酵母菌。

2)麦芽汁培养基:

麦芽膏20

琼脂20

陈海水或自来水1000毫升

将各成分溶解于水中,用氢氧化钠溶液调pH 6.5 ,分装,121 蒸汽下灭菌20 分钟。制成平板或斜面,待用。

3)麦芽汁葡萄糖琼脂:

麦芽膏20

葡萄糖20

蛋白胨l 克.

琼脂20

陈海水或蒸馏水1000毫升

将各成分溶解于水后,分装,112 蒸汽下灭菌15 分钟.制成平板或斜面.

2 .分离步骤

1)按10倍稀释法将样品制成合适的稀释液(10-210-310-4)。

2)各取0.1毫升稀释液于加数滴80%乳酸的麦芽葡萄糖琼脂平板培养基上,用无菌弯曲玻棒涂匀.每个稀释度制2 个培养皿。

3)倒置培养皿于25-30 下培养3-4 天.

4)观察菌落特征,挑取所需菌落接种于斜面培养基上.

 

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