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光合细菌培养基配方及菌种



录入时间:2010-9-14 15:03:55 来源:互联网

 

光合细菌培养基配方

光合细菌是兼性厌氧的,光合细菌的富集培养基是:

NH4Cl   0.1g  

NaHCO3 0.1g   

KH2PO4 0.02g       

CH3COONa 0.1-0.5g   

MgSO4·7H2O 0.02g

NaCl  0.05-0.2g

三生长因子1ml 

微量元素溶液1ml 

蒸馏水97ml 

PH7.0

生长培养基加氮源(谷氨酸钠)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸盐等)即可.其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离

光合细菌培养基配方

氯化氨1,磷酸氢二钾0.5,氯化镁0.2,氯化钠2,酵母膏0.1,水900毫升。

各成份溶解后15灭菌20分钟,然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0/50毫升水;50毫升过滤的乙醇。用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0即可。

响应面设计法优化光合细菌培养基配方。培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著,最优培养基配方为:醋酸钠1145gL、蛋白胨0055gL、碳酸氢钠06gL、硫代硫酸钠04gL、氯化钠03gL、硫酸镁01gL、磷酸二氢钾005gL。在此条件下,光合细菌生长最为良好,经过5d培养以后,培养液OD600可以达到0.5以上

 

优良的光合细菌菌种的外观质量

   一般优良的光合细菌菌种和产品的外观质量有以下几点:

1、外观上看比较均匀,基本无上下分层。  

相反,市场上有许多光合细菌是上下分层的,上层比较清淡,下层则比较深厚,上层颜色浅,下层颜色深,最底层可能还会有一层黑黑的沉淀。
  
而优秀的光合细菌菌种和产品,上下都是比较均匀的,没有较明显的分层,颜色比较均匀,外观看起来也悦目。(当然,除了培养基溶解时,会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外)
  
这种上下无分层,颜色均匀,不是靠加悬浮剂,或增稠剂而造成的,而是自然培养出来的,不加任何修饰而成的。少数地方,由于水质的原因,可能会产生稍稍的差别。
2
、没有粘壁现象。   

很多市场上的产品都有粘壁现象,即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层,就象是油漆一样,洗不掉,抹不去。这主要是在培养过程中形成的,也有在保存过程中形成的。

  优秀的光合细菌菌种和产品,应该是没有一丝一毫的粘壁现象。所以外观上看起来质量也更好
3
、颜色的深度比较深。   

根据国家质量标准,可以用721分光光度计,测量A660nm处的吸光值,如果大于1.5,则说明,浓度一般都在30亿/毫升以上,好的光合细菌菌种和产品都在1.5以上。
4
、颜色鲜艳无杂色。   

 优秀的菌种和产品,不仅颜色深,而且,比较鲜艳,没有杂色,比如是大红色,血红色,或是深紫色,看起来是很悦目的,没有不良的杂色,或是暗暗的颜色。
5
、保存期限长。   

可以保存夏天3月以上,冬天6月以上。在期限内外观基本无变化。保持80%以上的活力。
6
、培养周期短,接种量少。   

好的菌种,接种量在10--20%即可,我中心推崇20%接种量,培养条件好的,可只用10%接种量,都可以在3--5天内培养好(条件是用白炽灯培养, 温度在30--37度),或在7天培养好(条件是用太阳光照培养,阳光充足时,仅是白天照射培养,液体温度在30--38度,晚上不培养)。
  
而市场上很多菌种要50%以上接种量,当然,在有条件情况下,用大接种量是有好处的,在有条件的情况下,推荐用30%的接种量,能更稳妥,更快地培养成功。
7
、基本不存在杂菌污染     

在保证清洁培养的情况下,一般不存在杂菌污染的情况,当然,这也与培养基配方技术有一定关系。

8、可以无限制地循环培养下去。     

不仅可以无限制地循环培养下去,而且,性能不变,质量不减。当然,这也与培养基配方技术有一定关系。

小规模光合细菌灯光培养中用60--100瓦白炽灯较好

 在实验室用纸箱法培养光合细菌时,要用到白炽灯(注意,不能用日光灯,日光灯的光波不适合培养光合细菌,所以日光灯是没有用的),以前做的试验由于是用 500*500*350mm的小纸箱,所以有40瓦的白炽灯就可以维持箱内温度在35左右,甚至到40,用40瓦的白炽灯培养,一般需要5天以上才能长得非常深红色。

   后来用到了700*700mm的大纸箱,才改用60瓦的白炽灯,发现培养的时间可以大大缩短了,而且进入冬季后,纸箱中的温度只能维持到25,我们 发现,即使是在25的箱内温度下,也只要培养4天左右就长得非常深红色了,经过分析,可能是60瓦以上的白炽灯的光波更加适合于光合细菌的生长繁殖,所以建议,改用60瓦的白炽灯,可以大大提高培养的成功率,和大大缩短培养的时间。

   如果是夏天,若用60瓦的白炽灯太热,可以在纸箱上戮大量孔洞,用于散热,维持箱内温度在35度左右。



 

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