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临床上常用的微生物培养基及其成分(1)



录入时间:2010-9-20 8:56:46 来源:互联网

 

1、营养琼脂(普通琼脂) 成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph76,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。用途:作普通琼脂平皿。

2、血琼脂平板(BA) 制法:取营养琼脂(PH76),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。用途:1. 一般棉拭子均接种此培养基。 2.尿液,脓液 3.分离细菌标本用。

3、基础培养基 (肉膏汤BB) 成份:蛋白胨 10 牛肉膏 5 氯化钠 5 1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH76,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。 2 作普通琼脂斜面。

4、血液培养基(大管肉汤培养基) 成份:1 新鲜牛肉浸液 1000毫升 2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升 3 MgSO4 [相当于0493/100毫升] 493% 1毫升 4 枸椽酸钠 03g 制法:1 1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。 2 取灭菌14号混合液用无菌法加入PABAMgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。用途:作血,骨髓培养用。

5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂) 成份: 蛋白胨 10 乳糖 10 氯化钠 5 琼脂 2522)克 水 1000毫升 2%伊红溶液20毫升 05%美兰溶液 20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH74过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,05%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。

6、罗文斯坦培养基 成份:磷酸二氢钾 24 硫酸镁 024 枸椽酸钠 06 天门冬素 36 纯甘油(丙三醇) 12毫升 水 600毫升 马铃薯粉 30 鸡蛋 1000毫升(约3公斤) 2%孔雀绿水溶液 20毫升制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。 2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。 3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。 4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。质控标准: 1 灭菌试验合格。 2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。用途:作结核分枝杆菌培养用。

7、结核半固体培养基 成份:磷酸氢二钠 19 硫酸镁 06 磷酸二氢钾 25 天门冬素 5 1%孔雀绿 15 甘油 20毫升 吐温8010% 5毫升 水 1000毫升 枸椽酸钠 25 动物血清 100毫升 琼脂 1580小时用甲醇去脂) 1%孔雀绿 078毫升吐温8010% 5毫升加动物血清 100毫升制法: 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH72 2 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。 3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。 4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。质控标准:1无菌实验合格。 2琼脂硬度合适而清亮。 3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。用途:培养结核杆菌用。

8、亚碲酸钾血琼脂平板 成份:琼脂基础 100毫升 1 0%葡萄糖 2毫升 1%亚碲酸钾 45毫升 绵羊血 10毫升制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。 2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸45毫升混合后倒入无菌平板,凝固后存冰箱备用。质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。

9、米培养基 成份:白米 20 1000毫升 琼脂 20 吐温80 10毫升制法:120米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。 3加琼脂20,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。质控标准:1灭菌。 2要求清亮。 3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。用途:培养白色念珠菌用。

 

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