TMP与氟苯尼考配伍应用对鸡大肠杆菌病的疗效试验

大肠杆菌病会引起鸡生长缓慢、饲料利用率降低，造成经济损失。目前防治这些疾病仍在使用各种抗生素，但耐药性问题越来越严重。氟苯尼考是较为敏感的药物，它抗菌谱广，与其它抗生素或抗菌药物之间不易产生交叉耐药性，而且多数呈协同作用。它使用安全(除妊娠动物外)，应用十分广泛。为了进一步增加氟苯尼考的疗效，降低成本，我们用三甲氧苄啶(TMP)与氟苯尼考配伍应用对鸡大肠杆菌病的疗效进行研究测定。
在实验室工作的基础上，通过大量多次反复实验发现，用TMP与氟苯尼考配伍，配伍比例大约为1：5，药物浓度为50 μg/ml，即每毫升的药液浓度含TMP 8 μg、氟苯尼考42 μg，对鸡大肠杆菌病有确切的疗效。为了进一步证实其治疗效果，我们选择临床鸡大肠杆菌病进行治疗试验，并用氟苯尼考和恩诺沙星作对照，试验结果表明，TMP与氟苯尼考配伍之后，无论从死亡率、治愈率、增重率上均好于氟苯尼考和恩诺沙星对照组。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品
氟苯尼考，含量为90%，批号040301；TMP，含量为98%，批号031101；恩诺沙星，含量为99%，批号031012。
1.1.2 试剂
蛋白胨、氯化钠、酵母膏、琼脂购自杭州天和试剂有限公司。
1.2 方法
1.2.1 发病情况
发病时间为2005年9月，锦州市某鸡场所饲养的海兰褐蛋鸡15 000只，50日龄，发病4 d，发病数为5 000多只，死亡2 000多只，曾用过卡那霉素、阿莫西林、恩诺沙星等药物进行治疗。
1.2.2 观察临床症状和剖检变化
病鸡表现为离群呆立、羽毛松乱、食欲减退，部分鸡排黄白色稀便。剖检主要表现为心包积液，心包膜混浊、增厚、不透明，严重的有纤维素渗出；肝脏有不同程度的肿胀，表面有不同程度的纤维素性渗出物，甚至整个肝脏为一层纤维素性薄膜所包裹；腹腔有不同程度的腹水，混有纤维素性渗出物。
1.2.3 实验室检查
采病料：无菌采取肝脏、腹水和心脏血液接种于普通琼脂斜面和麦康凯培养基中。
染色镜检：病料涂片，革兰氏染色，然后镜检。
生化试验：将分离的纯培养物移植到三糖铁琼脂上及生化培养基中培养。
致病性试验：将经过鉴定的杆菌，用其18 h的肉汤培养物0.4 ml口服感染5日龄雏鸡，测定其致病力。
1.2.4 诊断
根据发病情况，结合主要表现、剖检变化，初步诊断为鸡大肠杆菌病，再经过实验室检查确诊该病为鸡大肠杆菌病。
1.2.5 治疗 
1.2.5.1 分组
初步确诊后将病鸡分为4组：感染对照组、TMP与氟苯尼考配伍应用组、氟苯尼考组、恩诺沙星组（见表1）。健康鸡用氟苯尼考与TMP配伍应用预防。
 
对各组鸡进行饮水给药治疗，各组鸡每天早、晚各饮水一次，连续给药5 d，每次用药前观察临床症状，并对死鸡进行剖检，观察肝脏和腹腔病变情况，以确定死因，观察期为第一次用药后的第15 d。
1.2.5.2 疗效评价标准
① 死亡率：试验期间凡出现鸡大肠杆菌病典型症状死亡的，以及尸体剖检肝脏和腹腔有典型病变特征死亡的均为鸡大肠杆菌病死亡，根据死亡数计算死亡率。
② 治愈率：凡在试验期间，鸡用药后精神状态、食欲、粪便恢复正常，不再出现腹泻等临床症状者，均属治愈，根据治愈鸡只数占整个试验组的比率计算治愈率。
③ 有效率：用药后，试验鸡只的精神、食欲、腹泻有明显好转，体重较用药前增加者，判断为有效。据此计算有效率。
④ 增重：根据给药前及试验结束时的鸡只体重，计算每只鸡的增重，然后算出每组试验鸡的平均增重和标准差。
2 结果
2.1 临床上大肠杆菌病的鉴定结果
2.1.1 革兰氏染色
病料革兰氏染色发现红色阴性的短小杆菌。分离培养在37 ℃恒温箱中，在琼脂培养基上长出中等大小、半透明、露珠样菌落，在麦康凯培养基上菌落呈红色。
2.1.2 生化试验
用此菌分解乳糖和葡萄糖，产酸、产气；不分解蔗糖，不产生硫化氢，V-P试验阴性，利用枸橼酸盐阴性，不液化明胶。
2.1.3 致病性试验
经口服感染5日龄雏鸡引起急性败血症死亡。
通过实验室检查(包括病料采集、培养、染色镜检、生化试验、致病性试验及临床诊断)，我们确认鸡只感染了大肠杆菌病。
2.2 治疗结果（见表2）
 
TMP与氟苯尼考配伍应用组的死亡率最低，其与氟苯尼考组和恩诺沙星组相比差异显著，治愈率、有效率最高，15 d增重最多。
3 讨论
目前临床上鸡的肠道性疾病大多数是由细菌感染引起的，如大肠杆菌病、沙门氏菌病、巴氏杆菌病等；还有一部分是由病毒感染引起的，如鸡新城疫、禽流感、鸡传染性法氏囊炎等。所以在防治鸡肠道性疾病时，应根据其临床症状、剖检变化、染色镜检、生化试验、致病性试验等准确地作出诊断，确定病原后，再采取相应措施对其进行有效控制。针对细菌性的肠道性疾病一般常采用疫苗预防和药物治疗等措施进行控制。但在实际临床上由于缺乏科学的用药指导，用药比较混乱导致细菌的耐药性增强，特别是鸡的大肠杆菌病在集约化的养鸡场都不同程度的存在，并且常和其它疾病混合感染，对常见的抗生素普遍存在耐药性，使得可供选择的治疗鸡大肠杆菌病药物越来越少，给养禽业造成的损失日益严重。本研究对鸡大肠杆菌病临床治疗提供试验依据，避免盲目用药，在实验的基础上，对TMP与氟苯尼考配伍应用在临床上的治疗效果作了进一步研究。首先通过临床症状、病理变化以及病原分离培养等方法，证实了鸡感染了大肠杆菌病。然后把该鸡场发病鸡分成3组，分别用TMP与氟苯尼考配伍应用、氟苯尼考、恩诺沙星进行对比治疗。结果表明，TMP与氟苯尼考配伍应用对鸡大肠杆菌病的疗效显著，无论从治愈率、有效率、增重率上均优于氟苯尼考组、恩诺沙星组。研究表明,TMP与氟苯尼考配伍可作为此发病鸡的首选药物。
4 小结
用TMP与氟苯尼考配伍，配伍比例分别为1：5，药物浓度为50 μg/ml，即每毫升的药液浓度含TMP 8 μg、氟苯尼考42 μg；TMP与氟苯尼考配伍应用混饮适合浓度为50 mg/l。能显著提高氟苯尼考抑制鸡大肠杆菌病的效果；对于自然感染鸡大肠杆菌病的治疗，氟苯尼考与TMP配伍应用的治疗效果优于氟苯尼考组以及恩诺沙星组。

 

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