菌体抗原“缺失”的宋内氏志贺菌研究

【摘要】  　　目的：研究O抗原“缺失”的宋内氏志贺菌其它生物学性状的变化情况。方法：检测试验菌株的生化特性和对抗生素的敏感性，以及用多种批号的诊断血清进行凝集试验。结果：具有典型的宋内氏志贺菌的生化特性；与对照菌相比，有较高抗生素耐药性，对复方新诺明等多种抗生素耐药。与效期内的多批宋内氏志贺菌诊断血清不能产生凝集反应，而对照菌凝集良好。结论：该株宋内氏志贺菌的O抗原表达减弱，同时药敏谱也产生明显的改变。

【关键词】  宋内氏志贺菌 O抗原 变异

　　[Abstract]   Objective： To study the other properties of Shigella sonnei  with “no” O antigen. Methods: The biochemistry properties and the sensitivity to antibiotics of studied bacillus were tested, and the O antigen of studied bacillus was tested with slider agglutination test. Results： The strain of studied Shigella sonnei had the representative biochemical properties of Shigella sonnei. Contrasting with the control strain of Shigella sonnei, the test strain could be higher antibiotics rate, and it could not be agglutinated by several anti-sera to Shigella sonnei, which were in the period of validity, but the control strain could be well agglutinated. Conclusion： The O antigen of the strain of the studied Shigella sonnei was distinctly reduced, and the effectual spectrum of antibiotics had been changed simultaneously.

　　[Keywords]   Shigella sonnei； O Antigen； Variation

　　变异是细菌生长繁殖过程中一个普遍现象，宋内氏志贺菌只有一个血清型，抗原组成单一，但无论在自然状况还是在实验条件下，均可自发地发生相的变异[1]，但是尚没有发现菌体抗原“缺失”的变异现象。2007年3月，我们在盐城市盐都区一名典型菌痢患者的粪便中检出1株宋内氏志贺菌，由于菌体抗原“缺失”,给菌型的鉴定造成了很大困难。现将有关情况报告如下。

　　1 　　材料与方法

　　肠道致病分离培养基：SS琼脂、Mac琼脂、半固体培养基、克氏双糖铁与三糖铁琼脂斜面培养基；志贺菌属诊断血清：兰州生物制品研究所和成都生物制品研究所生产的多批号诊断；API细菌生化鉴定系统；对照菌株：采用分离自我市当地的流行菌株的代表菌：宋内氏志贺菌（Ⅰ相）；试验菌株及其分离培养方法：分离自一名临床症状典型菌痢患者的粪便中。患者粪便直接接种SS 琼脂或Mac琼脂，37 ℃培养24小时的菌落。挑取这种可疑的单个菌落接种克氏三糖铁琼脂斜面培养基。37 ℃培养24小时，成典型的志贺菌属样生化反应。然后将纯培养物接种API20E细菌生化试验条，进行生化特征鉴定；玻片凝集试验：根据生化试验结果，用志贺菌属宋内氏菌诊断血清进行玻片凝集试验；传代试验：将试验菌株用克氏双糖铁琼脂斜面连续传代，每传一代后都用志贺菌诊断血清进行凝集试验。原始菌种用半固体琼脂培养基保存，同时观察其动力；药敏试验：法国生物梅里埃Vitek32细菌鉴定与药敏系统。

　2　  结      果

　　本次研究的菌株，经鉴定为Ⅱ相宋内氏志贺菌，氧化酶阴性，硝酸盐还原阳性，无动力，发酵葡萄糖不产气，具有典型的宋内氏志贺菌的生化反应性（表1略），但与效期内的各批号宋内氏志贺菌诊断血清（包括四种多价血清）都不能凝集，而对照菌株与这些诊断血清能够很好地凝集。用已经超过效期、保存良好的多批次宋内氏志贺菌诊断血清（包括4种多价血清）进行凝集试验，大多数都能产生很好的凝集现象（表2略）。进一步研究发现，与对照菌株相比较，试验菌株有较高抗生素耐药性，对复方新诺明等多种抗生素耐药（表3略）。

　　3　  讨      论

　　本文分离鉴定出的宋内氏志贺菌，其生化特征典型、菌体抗原表达减少的变异菌，由于菌体抗原量少，而在效期内的诊断血清，其效价较高，两者的比例不适当，容易出现前滞现象[2]，因而，在玻片凝集试验时不能出现肉眼可观察的凝集现象。而过了有效期较长时间的诊断血清，由于其抗体效价下降很多，与细菌表达的菌体抗原比例相配，因而，试验时就可出现肉眼可观察的凝集现象。宋内氏志贺菌的这种变异现象是很少见的，在有关文献上尚无记录。

　　在日常工作中，一般用效期内诊断血清进行凝集试验，不会用过期很久的血清来试验。如果样本不是来自一个症状典型的患者，而又没有条件进行API试验等时，像这样的菌株往往就漏诊，给病原菌的分离鉴定带来了很大困难。同时，又由于变异后伴随对抗生素敏感谱的改变，给临床治疗带来麻烦。通过这个菌株的分离鉴定，进一步揭示了细菌系统生化试验的重要性，也就是说，在双/三糖铁琼脂斜面上呈典型反应，且菌苔也非常典型时，一定要进一步做系统生化试验，防止漏诊。

【参考文献】
  [1] 叶应妩主编. 全国临床检验操作规程[M]. 第3版. 北京：中华人民共和国卫生部医政司，2006：813-814.

[2] 陈慰峰主编. 医学免疫学[M].第4版.北京：人民卫生出版社，2004：242.

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