两种培养基对嗜血杆菌属分离鉴定的比较

 嗜血杆菌属与临床有关的种有9个，而流感嗜血杆菌是一种只侵犯人的兼性厌氧的革兰阴性杆菌，主要寄生在上呼吸道，与许多感染性疾病有关。为了选择检测效果好、成本低的培养基对嗜血杆菌属进行鉴定与分型，本实验利用进口原料配制的培养基（H1）和国产原料配制的培养基（H2）对住院病人呼吸道感染者痰液及咽拭子标本200份，其中成人152份、儿科住院患者48份的嗜血杆菌细菌进行了分离培养及鉴定并做血清学分型。

    1  材料与方法

    1.1  培养基  （1）用进口原料配制的培养基（H1），Oxid公司的胰蛋白大豆琼脂作基础，加入10%无菌羊血，15μg/NAD及300μg/ml 杆菌肽制成巧克力平板。（2）用国产原料配制的培养基（H2）：浙江天和微生物试剂公司的淋病奈瑟氏菌培养基作基础，加1%酵母粉，10%无菌羊血，50mg/L万古霉素制成巧克力平板。（3）血琼脂平板及普通琼脂平板：常规法制备。（4）浙江产心脑琼脂加马血培养基。

    1.2  方法   （1）分离培养：将痰液或咽拭子划线接种于H1和H2培养基上，置烛缸中（3%～5%CO2），35℃培养24h，选可疑菌做革兰染色卫星试验，糖发酵试验。（2）流感嗜血杆菌b型乳胶凝集试验：用于血清分型，区分b型和非b型菌株。（3）将临床分离的嗜血杆菌属细菌接种于浙江产心脑琼脂加马血培养基置烛缸35℃、24h培养，与H1和H2培养基进行比较。

    2  结果

    2.1  H1和H2培养基的比较  （1）嗜血杆菌属细菌在两种培养基上生长良好杂菌被抑制，H2对草绿色链球菌抑制作用明显。（2）嗜血杆菌分离情况见表1。经χ2检验，两种培养基对嗜血杆菌分离率差异无显著性(P>0.05)。

    2.2  H1培养基对成人与儿童呼吸道标本中嗜血杆菌属细菌的分离情况  见表2。成人与儿童嗜血杆菌的细菌分别为13株和17株，分离率分别为8.6%和35.4%，其中流感、副流感、副溶血、嗜沫嗜血杆菌的菌株数（分离率）为两种培养基对200份临床样本。表1  嗜血杆菌分离情况表2  成人与儿童临床标本嗜血杆菌属分离情况（略）

    2.3  血清分型  临床分离到的9株流感嗜血杆菌，b型1株，非b型8株。

    2.4  临床分离的嗜血杆菌属细菌在国产心脑琼脂加马血培养基上均生长。

    3  讨论

    (1)虽然H2培养检测结果好，但需要进口，成本高，H2培养基利用国产做基础，降低了成本。该培养基中的万古霉素有效地抑制杂菌生长，增加了培养基的选择性且具有嗜血杆菌菌落易识别的特点。表1显示H1和H2两种培养基对嗜血杆菌的分离率差异无显著性，H1和H2及国产心脑琼脂加马血培养基的分离效果相似。

（2）儿童嗜血杆菌属流感嗜血杆菌分离率（35.4%，12.5%）高于成人（8.6%，0.52%），呼吸道标本中副流感嗜血杆菌分离率高于流感嗜血杆菌。

作者：唐丽英

   作者单位： 161005 黑龙江齐齐哈尔，齐齐哈尔市第一机床厂职工医院

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