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血液中脑膜炎奈瑟菌的分离鉴定药敏试验及临床分析



录入时间:2010-12-10 11:33:38 来源:中国论文下载中心

   

 流脑至今仍是世界各国非常关注的一种常见的急性呼吸道传染病,其病原菌就是脑膜炎奈瑟菌。此菌经呼吸道进入机体,突破血脑屏障入侵颅脑,引起急性脑脊髓炎,甚至引发暴发性流行[1]。据WHO最近报告,进入20世纪90年代后期,在非洲的一些国家内又出现了流脑新的周期流行,1996年至1998年共报告了265 454例,病死率为10~20%。此外,在冰岛、苏格兰和英格兰等地也报道[2]过此病发病增多,并出现局部地区流行。除脑脊液外,此菌在血液中也时有发现,且不时出现于成人身上,傅萍[4]就曾于2003年报道过一中年患者的血液中培养出一例A型脑膜炎奈瑟菌。笔者也于20053月通过血培养发现1例,现报告如下。

  临床资料

  患者,女,18岁,是一个系统性红斑狼疮的病人,于200536入院。患者高热,肢体抽搐,无寒战,神志不清伴呕吐,初疑为神经系统感染,但头部CT未见异常,脑脊液压力正常,其常规及生化检查:WBC 30×106LRBC 540×109L,蛋白质定性为阴性,GLU 0.09 mmol/LCl 125 mmol/L,涂片未见细菌,培养亦未见细菌生长。但血液分析发现:WBC 142×109/L,分类N 73%,L 23%,M 4%。39抽取血液,经全自动血液分析仪培养及一系列生化试验,鉴定为脑膜炎奈瑟菌。将鉴定及药敏结果及时上报相关临床科室,经青霉素类及头孢类的联合用药,2 d后症状基本消失,4 d后病情基本稳定。翌日,因病人家属以无法支付医疗费用为由要求出院,之后无法跟踪。

  培养鉴定

  于患者高热期间,按常规无菌抽取血液5 ml~10 ml分别注入SA(需氧)SN(厌氧)培养瓶,贴上标签立即送检,标本送至微生物室后,立即置入BactAlert―240血培养仪中进行全天24 h监测,约于8 h~10 h后提示阳性。立即将标本取出,接种于血平板和选择性子板(胆盐平板),分别置35 -CO235 -O2培养箱,且于35 ―CO2培养箱中加种奈瑟菌分离培养专用的巧克力平板,经18 h~24 h,发现35-CO2培养箱中的巧克力平板及血平板有细小光滑、灰白或灰褐色、半透明、圆形凸起的类似奈瑟菌的菌落生长,其余平板无菌生长,经涂片染色镜检,为革兰阴性双球状、肾形成双排列、坦面相对的球菌,疑为脑膜炎奈瑟菌,且立即向临床进行初步报告。

  生化特征

  使用手工与ATB Expression―Api-NH鉴定试纸同步进行检测鉴定,测得其生化结果见表1

  表脑膜炎奈瑟菌的生化特征()

  ATB Expression―Api-NH测得其生物系统编码为5002,鉴定几率99.9%,鉴于上述特征,可确定为脑膜炎奈瑟菌。取24 h纯培养的菌落,经奈瑟菌血清凝集试验,确定为A群。

药敏试验

  主要采用M-H纸片扩散法(K―B),使用英国OXOID公司的产品,且用ATCC―49226(淋病奈瑟菌)ATCC―49619(肺炎链球菌),严格按照NCCLS规定的标准进行质量控制。测得的结果见表2

  表脑膜炎奈瑟菌的药敏试验结果()

  注:S:敏感,R:耐药

  由药敏试验结果可知,此菌对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类,单环β内酰胺类以至碳青霉烯类等抗生素均敏感,在治疗上并不困难。

  讨论

  在我国流行的脑脊髓膜炎以A群为多见。我国过去也是流脑高发病的国家之一,虽然目前发病率己受控制,但局部流行仍可发生,而今,我国国内人口流动日趋广泛,国际交往日益濒繁,这无疑增加了此病传播流行的机会,及近年来湖北、广东等省己出现了成年病人患病比例上升的现象,应引起高度重视。

  脑膜炎奈瑟菌可寄生于正常人的鼻咽部,其携带率可达5%~15%,大多数情况下仅表现为鼻咽炎,只有当机体抵抗力下降时才可引发感染,而感染者大多为15岁以下的儿童[3]。但脑膜炎奈瑟菌也是流行性脑脊髓膜炎的病原菌,而人类正是其唯一宿主,感染后若不及时救冶,病死率极高。

本菌对体外环境的要求较高,抵抗力弱,且有自溶现象。故在标本采集后应立即送往临床微生物实验室,或用专用培养基进行病床旁接种后立即孵育培养,否则,易出现假阴性结果,对临床的诊治带来误导。脑膜炎奈瑟菌在发病初期大多在于血液内,但血培养阳性检出率仅为50~60%,若时机把握不好,检出率会大大降低,甚至为阴性,故此,血样的采集必须在患者高热期间及使用抗生素之前。此次本菌在一免疫系统性疾病患者血中的检出,无疑对临床的诊断、治疗以及实验室的培养鉴定与药敏试验均有着较重要指导性意义。

作者:马均宝 何艳嫦

  参考文献:

  [1  刘长云,童详华.聚合酶链反应检测脑膜炎奈瑟菌DNA片段[J.中华医学检验杂志,199619(2)109.

  [2  孙银燕,胡敬绪.脑膜炎奈瑟菌AcpsBompc偶联物的免疫原性、安全性和稳定性[J.中华微生物学和免疫学杂志,200222(2)170174.

  [3  密新昌.一起脑脊髓膜炎暴发流行的检验结果分析[J.中华实用中西医杂志,20044(17)229230.

  [4  傅萍.从血液培养中分离出一株A群施膜炎奈瑟菌[J.实用医技杂志,20029(8)586.

 

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