临床分离鉴定435株念珠菌及药敏结果分析

　［摘要］ 目的：了解我院念珠菌感染和耐药情况。方法：对临床标本分离的念珠菌用VITEK32鉴定仪鉴定，对分离株进行抗生素体外敏感性检测。结果：435株念珠菌以白色念珠菌检出率居首位。435株念珠菌对4种抗真菌药物出现不同程度的耐药。结论：广谱抗生素、免疫抑制剂和抗肿瘤药物的广泛应用，增加了真菌的感染机会，应加强真菌的耐药性监测，以指导临床合理使用抗生素。

　　［关键词］ 念珠菌；药敏试验；耐药性

　　Clinical Isolation and Drug Resistant Analysis of 435 Strain of Candidasp

　　Abstract：Objective To investigate the candida infection and their resistant to antifungal agents in our hospital recetly.Methods The 435 fungi isolated from the specimens were identified by VITEK32，then their drug sensitivity test to antifungal agents were carried out in vitro.Results Among 435 strain candida，the isolation rate of C.albicans was the bigbest，435 strain candida produced a vary degree resistance to 4 kinds of antifungal medicines.Conclusion Because of extensive application of broad antibiotic，immunity inhibitor and antitumorigenic drugs，the chance of fungus infection increases markedly.We should strengthen the mornitor of fungus drug resistance in order to guide clinical reasonable selection of antibiotics.

　　Key words：Candida；Drug sensitivity test;Drug resistance

　　近年来，随着免疫抑制剂，介入性检查治疗手段的广泛应用，肿瘤化疗、器官移植的开展，使临床深部真菌感染发病率逐年增高，尤其是念珠菌在住院患者的感染中最为常见［1］，再加上为了有效控制多重耐药性细菌引起的感染，大量新的、高效广谱抗生素用于临床，导致了由真菌引起的临床感染日益增多，而抗真菌药物的使用，又使真菌治疗后的耐药问题日渐突出［2～4］。因此开展真菌(尤其是念珠菌)的体外药敏试验，指导临床医生合理用药已受到越来越多的重视。本研究分析了我院2003年1月至2005年6月临床分离的435株念珠菌的检出率、菌种分布及耐药现状，现报道如下。

　　1　材料和方法

　　1.1　菌株来源　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　取自本院住院感染患者的标本，包括血液、痰、尿液、伤口分泌物及粪便等。从这些标本中分离出435株念珠菌。

　　1.2　培养与鉴定　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　血液深部无菌标本采用BACT／ALERl20及其配套培养瓶，按操作规程进行培养；痰、粪便等有菌标本接种于沙保弱培养基，霉菌培养箱30 ℃培养48 h~72 h后，挑选新鲜纯菌落，经涂片、革兰染色镜检证实为酵母样真菌后，采用法国生物梅里埃公司生产的YITEK32全自动微生物分析仪和专用鉴定卡YBC进行鉴定。

　　1.3　药敏试验　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　将分离的菌株用无菌生理盐水配制2个麦氏浊度菌液，按ATBFUNGUS2药敏试剂盒说明操作和判读结果。4种抗真菌药物是：5氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑。质控菌株为C.albicansATCC90028。

　　1.4　数据处理　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　WHONET5药敏统计软件。

2　结果

　　2.1　菌株的构成及临床标本的分布　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　在435株念珠菌分离鉴定结果中，白色念珠菌的检出占首位238株(54.7％)；其次是热带念珠菌70株(16.1％)等。在各类临床标本念珠菌分离中痰标本检出率最高，269份，占61.8％；其次是尿液62份，占14.3％，还有血液、粪便、各种分泌物等其他标本106份，占24.4％。见表1所示。表1　435株念珠菌鉴定及标本分布（略）

　　2.2　病房分布及年龄情况　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　从分析435株标本中发现念珠菌的分离在呼吸科病房最多，占24.6％；其次是ICU病房(9.4％)和血液病病房(6.4％)。住院患者中念珠菌分离60岁以上老年人占了48.9％。

　　2.3　药敏试验结果　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　435株念珠菌药敏结果显示，5氟胞嘧啶、两性霉素B对念珠菌作用最强，敏感率分别为90.8％和94.7％，其次为氟康唑敏感率为43.5％，伊曲康唑最差，耐药率达59.1％。见表2。表2　435株念珠菌药敏试验结果药物名称

　　3　讨论

念珠菌为人体最常见的共生菌，常存在于人的口腔、上呼吸道、肠道、阴道及土壤与腐烂植物中，属条件致病菌，当机体发生正常菌群失调或抵抗力降低时，引起机会感染。目前由于大量应用抗生素、皮质激素、免疫抑制剂和抗肿瘤药物及侵入性医疗操作等，使体内正常菌群的生态平衡遭破坏，增加了多重耐药和真菌感染的机会，念珠菌感染也越来越多，成为不可忽视的重要的医院感染病原菌［4，5］，因此其分布和药敏试验日益受到临床重视。在检出的435株念珠菌中，白色念珠菌占54.7％，其原因是白色念珠菌菌丝与芽管不易被吞噬，致病性强，容易引起感染，虽然白色念珠菌的检出率仍占首位(54.7％)，热带念珠菌占16.1％，与以前文献报道［5］相近，但是其他念珠菌的检出率亦占29.2％，而这些念珠菌主要分布在呼吸科、ICU病房、血液及老年患者中，说明在念珠菌引起的院内感染中，除白色念珠菌与热带念珠菌外，其他念珠菌也具有不可忽视的重要性。从435株念球菌在临床标本中的分布来看，痰的检出率仍为最高(54.7％)，其次是尿液(14.3％)，再次就是粪便和血液，分别占7.6％和4.6％。造成呼吸道感染较为严重的原因可能是：广泛使用广谱抗生素，致使抗体抵抗力低下；环境污染日益严重，使易感人群增加；院内交叉感染；随着呼吸机和支纤镜等仪器普遍使用，也易引起念珠菌感染；再者特别是对老年患者和患有基础病患者不仅要做及时治疗，合理用药，而且更要注重早期预防。随着念球菌感染的增加及抗真菌药物应用的日益增多，耐药菌株的产生亦屡见报道，从我们的实验结果来看，临床常见念珠菌对两性霉素B和5氟胞嘧啶较敏感，敏感率分别为94.7％和90.8％。但由于两性霉素B和5氟胞嘧啶都对人体具有较大的毒副反应，因此，限制了该类药物在临床上的使用，探索与三唑类等药物联合使用，以减少用量，降低药物的毒副作用很有必要。本研究显示氟康唑的耐药率高达38.6％，这与以往的报道［4～6］有所不同，应引起重视。因为近年来氟康唑由于具有高效、低毒、可口服又可静脉用药等优点，广泛应用于临床。可能由于临床使用较多，使耐药率在不断上升，还需继续研究。两性霉素B的耐药性最低，仅为1.2％，伊曲康唑的耐药率达59.1％，与国内文献报道［6］有一定差异。总之，为了降低院内真菌(尤其是念珠菌)的感染，我们应加强对环境微生物学的监测与消毒管理，注意无菌操作技术，尽量减少侵入性操作，大力提倡一次性医疗用品的使用，合理使用抗生素和院内念珠菌感染的早期确诊非常重要，以延缓和防止真菌耐药性的进一步发展。

作者：艾辉，徐小平，李卓成《实用医技杂志》

　　参考文献：

　　［1］吴邵熙.现代医学真菌检验手册［M］.北京：医科大学联合出版社出版，1998：71.

　　［2］Denning D W,Munoz P.Advances in invasive fungal infection and antifungal terapy：Introduction［M］.Clin Microbiol Infect，2001，7(2)：6.

　　［3］周贵民，谢灵.国内酵母菌感染和实验室诊断的现状及建议［J］.中华医学检验杂志，1996，19：301303.

　　［4］黄云昆，夏星，李婷，等.临床标本中酵母样真菌的分离及耐药性现状分析［J］.中华医学检验杂志，2003，26：566.

　　［5］张正，赵素蕊，庞良锦，等.临床分离475株酵母样真菌调查分析［J］.中华医学检验杂志，1996，19：267269.

［6］陈东科，许宏涛，陶风荣，等.深部酵母样菌感染的病原学变化及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2002，12：785786.

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