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6种天然药物对乳酸杆菌体外抑菌作用的研究



录入时间:2011-1-17 10:00:17 来源:中国论文下载中心

【摘要】  目的  研究6种天然药物对乳酸杆菌体外的抑菌作用。方法  以乳酸杆菌作为实验菌株,测定五倍子、大黄、黄连、黄芩、三七和川芎6种天然药物的最小抑菌浓度(MIC)。结果  大黄MIC为4.0mg/ml,五倍子和黄连均为8.0mg/ml。而黄芩、川芎和三七对乳酸杆菌的生长无明显的抑制作用。结论  五倍子、黄连和大黄对乳酸杆菌的生长均有抑制作用,而川芎、黄芩和三七对乳酸杆菌无明显的抑制作用。
    【关键词】  天然药物;乳酸杆菌;抑菌作用
    乳酸杆菌(Lactobacillus)是口腔正常菌群的主要成员之一。由于它在牙本质龋中的大量存在,决定了它在龋病发展中的地位。口腔是一个复杂的生态环境,正常菌群在口腔的生长和繁殖,对宿主起到有益与破坏的双重作用。因此,单纯杀灭口腔中某种细菌,对破坏口腔内的微环境会带来不利影响。本研究选用6种可能具有调理作用的天然药物,包括五倍子、大黄、黄连、黄芩、川芎和三七,研究其对乳酸杆菌体外抑菌作用,为防治龋病,选择调理口腔正常菌群的生态平衡的药物提供理论依据。
    1  材料与方法
    1.1  实验菌株及菌液制备  乳酸杆菌(Lactobacillus)菌株由广东医学院微生物学教研室提供。  将复苏48h的乳酸杆菌接种于TPY液体培养基中,37°C厌氧培养18h,将培养液置于3000r/min离心15min,收集细菌,应用麦氏比浊标准,调整细菌浓度为108CFU/ml。
    1.2  中药粗提物制备  中药五倍子、大黄、黄连、黄芩、川芎和三七均购自湛江天马大药房。将上述中药分别放入红外线快速干燥器中,干燥15min后,碾成粗粉,然后放入电脑干燥箱中,120°C 30min灭菌备用。采用水粗提法,撮五倍子、大黄、黄连、黄芩、川芎和三七的有效成分。水粗提法:用上述干燥的中药粉末50g,加500ml蒸馏水,在2000W电炉上加热至沸腾,保持微沸1h,乘热过滤,在80°C以下减压浓缩至50ml。放入干燥洁净的玻璃密器中,4°C密封保存。
    1.3  6种中药粗提物对乳酸杆菌的最小抑菌浓度(MIC)测定  将上述6种药物的粗提物按倍比稀释法溶于TPY琼脂培养基中,使其终浓度达到16.00mg/ml、8.00 mg/ml、4.00 mg/ml、2.00 mg/ml、1.00 mg/ml、0.50 mg/ml、0.25 mg/ml、0.125 mg/ml分别接种乳酸杆菌(108CFU/ml)0.1ml,于37°C厌氧培养48h。 以无细菌生长的最低药物浓度为其MIC值。
    2  结果
  在6种中药粗提物对乳酸杆菌最小抑菌浓度的测定试验中,发现大黄在4.0mg/ml浓度下即表现明显的抑菌作用,五倍子和黄连在8.0mg/ml时也表现出抑菌作用。而川芎、黄芩和三七则对乳酸杆菌的生长无明显的抑制作用。
3  讨论
    现代龋病病因学研究认为,龋病本质上是菌群生态失调性疾病。牙菌斑是龋病发生的启动因子。当牙菌斑内致龋比例异常增高,而益生菌比例异常减少时,使牙菌斑由体致龋性菌斑向致龋性菌斑转化。乳酸杆菌被认为是重要的致龋菌。近年来许多学者从大量化学和生物制剂中寻求有效的抗菌斑药物,国内外学者从天然药物中分离抗龋药物,并已初获成效。已发现了茶中以鞣酸为主的酚类化合物,可以抑制变形链球菌的生长[1],从而有利于龋菌的防治。Iwamoto等[2]发现了来自槟榔的5′-核苷酸酶抑制剂可抑制变形链球菌生长与产酸,具有防龋病的作用。熊炎斌[3]的研究发现中药大黄、五倍子等均能抑制变形链球菌的生长,其浓度与抑制效果呈正相关。
  本实验选用6种中药的相提物进行研究,以了解其对乳酸杆菌生长的影响,实验结果证实:不同的天然药物对乳酸杆菌的生长影响不同,其中大黄、五倍子、黄连对乳酸杆菌的生长有一定的抑制作用。抑制作用最强为大黄,其次为五倍子和黄连。其余药物对乳酸杆菌的生长没有明显的影响。
中药有着错综复杂的成分,对于其抗龋有效成分的确定,一直是研究的难点。以往的研究已发现,茶多酚中的鞣酸,具有收敛、抗菌作用,是主要抗龋成分,已证明其可降低牙菌斑的聚集[4]。本研究中所作中药五倍子、大黄等对乳酸杆菌的抑制作用也可能与鞣质的存在相关。本实验结果提示:五倍子、大黄和黄连可以抑制乳酸杆菌的生长,在龋病的防治及开发利用方面将具有广阔前景。
 
作者:宋燕丰,陈意清,姚苏格《中华现代中医学杂志》
    【参考文献】
    1  Otake S,Madimura M,Kuroki T,et al. Anticaries effect of polyhenolic compounds from Japanese green tea. Caries Res,1991,25:438-443.
    2  Iwamoto M,Uchino K,Toukairin T,et al. The growth inhibition of siteptococcus mutans by 5’-nucleotidase inhibitors fiom Aceca Catechu L.Chem Pharm Bull,1991,39(5):1323-1328.
    3  熊炎斌,李德玲,刘持平,等.几种植物药对变形链球菌生长、产酸,粘附影响的体外实验.中华口腔医学杂志,1997,32(5):261.
    4  Kashket S,Paolino VJ,Leiwis D,et al.Geucosy tians ferase inhibition by tannin-like Consti tuents of beverages .J Dent Res.1985,64(11):  212-216.

 

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