【摘要】 目的：了解铜绿假单胞菌对抗生素的耐药情况，为临床治疗提供依据。方法：收集临床不同感染部位标本中分离到的186株铜绿假单胞菌进行β内酰胺酶的检测及药敏测定结果分析。结果：186株铜绿假单胞菌对所测试的11种抗生素耐药5种以上的有72株，占38.7%，其中β内酰胺酶阳性的60株，占32.4%，β内酰胺酶阴性的有12株，占6.3%。结论：产β内酰胺酶的铜绿假单胞菌的耐药性更加严重，目前亚胺培南是治疗铜绿假单胞菌感染的首选药物，其次是丁胺卡那和头孢他啶。
【关键词】 铜绿假单胞菌； β内酰胺酶； 耐药性
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 收集本院2003年1月～2006年12月患者痰、咽分泌物、伤口分泌物、尿液、血液等标本中分离的186株铜绿假单胞菌。
1.1.2 质控菌株 铜绿假单胞菌ATCC 27853。
1.1.3 抗生素纸片 头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林、头孢哌酮、丁胺卡那、氨曲南、环丙沙星、亚胺培南、头孢噻肟、氯霉素、复方新诺明11种，均为法国生物梅里埃公司产品。
1.1.4 细菌鉴定 法国生物梅里埃公司ATB全自动细菌分析仪。
1.1.5 MH药敏琼脂 杭州天和微生物试剂有限公司产品。
1.2 方法
1.2.1 细菌培养 按全国临床检验操作规程（第2版）进行，将取获得的纯培养菌落用法国生物梅里埃公司ATB全自动细菌分析仪进行鉴定。将亚胺培南纸片贴于MH平皿中央，在其两侧距纸片中央24mm处贴头孢哌酮、头孢曲松纸片，经35℃温箱18～24h观察结果，任何一种或二种纸片抑菌环有“半扣样”切迹则为阳性，否则为阴性。
1.2.2 药敏试验 按NCCLS（2006版）规定进行KB法药敏试验，并从铜绿假单胞菌ATCC 27853进行质量控制。
2 结果
2.1 186株铜绿假单胞菌对抗生素的药敏情况
对亚胺培南、丁胺卡那、头孢他定的敏感性较高，敏感率均在80%以上，而对头孢噻肟、庆大霉素、复方新诺明、氯霉素等抗生素表现出较高的耐药性，耐药率均在50%以上。特别是复方新诺明和氯霉素，耐药率在90%以上，抗生素耐药情况见表1。
表1 186株铜绿假单胞菌对11种抗生素的药敏结果（略）
2.2 产β内酰胺酶的铜绿假单胞菌的耐药情况
表2 186株铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测及耐药分析（略）
186株铜绿假单胞菌中有103株产β内酰胺酶，占55.4%比高堂玲［1］等报道的75.7%低。β内酰胺酶阴性的铜绿假单胞菌对丁胺卡那、环丙沙星、亚胺培南、头孢他啶、哌拉西林等表现出高度的敏感性，均在90%以上；其次是氨曲南、庆大霉素、头孢哌酮等，敏感率在70%左右。对氯霉素、复方新诺明有较高的耐药性，耐药率＞80%。产β内酰胺酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南敏感性最高，敏感率91.3%；其次是丁胺卡那、头孢他啶，敏感率分别是77.7%、74.8%。对庆大霉素、哌拉西林、头孢噻肟有较高的耐药性，耐药率均为60%，氯霉素、复方新诺明几乎全部耐药。186株铜绿假单胞菌β内酰胺酶的检测及耐药情况见表2。
3 讨论
铜绿假单胞菌是革兰阴性杆菌中分离率最高的机会致病菌之一，也是临床上最常见的致病菌，是引起医院感染的重要病原菌之一。由于抗生素的广泛使用耐药性不断增强，多重耐药性已成为临床治疗的难点，其耐药机理是产β内酰胺酶，细菌外膜的通透性降低，菌体青霉素结合蛋白酶（PBPS）的结构和功能的改变［2］，以及带有耐药质粒的介导［3］。当细菌接触到亚抑制浓度的头孢菌素时，即被诱导产生头孢菌素酶，对氨基糖苷类药物的耐药则是产生修饰酶对抗生素的灭活。本研究显示铜绿假单胞菌对测试的11种抗生素耐药5种以上的占近40%，表明β内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性更加重要。至今，亚胺培南为治疗铜绿假单胞菌感染的首选药物，其次是头孢他啶及丁胺卡那，随着第三代头孢菌素的广泛应用和滥用以及新的β内酰胺酶的出现，导致铜绿假单胞菌对第三代头孢菌素的耐药性日趋严重，本研究显示铜绿假单胞菌对头孢噻肟的敏感率仅为11.8%，因此，严格控制三代头孢菌素的大剂量应用是临床迫切需要解决的问题。氨基糖苷类药物的敏感性成下降趋势，复方新诺明及氯霉素的耐药率＞90%，临床治疗时不应选用。
铜绿假单胞菌的多重耐药是医院感染和病人久治不愈的主要原因，因此患感染性疾病的病人应取可疑标本做细菌培养及药敏检测后，选择最有效、最适合其本人使用的抗生素，在治疗过程中根据具体情况密切注意抗生素的敏感性来调整治疗方案，对减少耐药菌株有着重要的意义。
作者：陈桂申 《数理医药学杂志》
【参考文献】
1 高堂玲，李慧华，何春蓉.呼吸病区铜绿假单胞菌耐药性监测.现代中西医结合杂志，2001，10（12）：1171～1172.
2 李彤，褚云卓.ICU病房痰标本中常见革兰阴性杆菌及其药敏结果分析.中国实验诊断学杂志，2007，11（6）：824～825.
3 康梅，韩琳林，陈慧莉，等.危重监护病房铜绿假单胞菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分析.中国抗生素杂志，2004，29（5）：293.
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