323株酵母样真菌菌群分布特点及E-test法药敏分析

［摘  要］ 目的：探讨2005年度在广东省人民医院检验科细菌室收检各类临床标本中分离到的酵母样真菌的菌群分布特点及其耐药性。方法：用常规培养方法从3 140份临床标本中分离出323株酵母样真菌，以美国walk/Away 40全自动微生物鉴定仪对所分离的酵母样真菌进行种群鉴定，并用ETest法做药敏试验。结果：323株真菌中，白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌等分别占63.8%、22.3% 和7.4%；对5种常用抗真菌药的耐药率排序依次为：5氟胞嘧啶(FC)1.9%、两性霉素B(AP)2.2%、酮康唑(KE)5.6%、依曲康唑(IT)10.2%、氟康唑(FL)12.1%。结论：临床上酵母样真菌感染以白色念珠菌和热带念珠菌较常见；真菌耐药菌株的检出率呈上升趋势，临床上必须重视真菌的检出和药敏试验。

　　

　　［关键词］ 真菌；药敏试验；ETest

　　Characteristic Microbial Population of 323 Strains and Its ETest Susceptibility Test　　

         the People's Hospital of Guangdong, Guangzhou,Guangdong 510000,China)Abstract：Objective To investigate the classify of fungus and antifungal resistance at Guangdong Provincialhospital in 2005.Methods 323 strains of fungus were cultured and isolated from 3 140 samples, and identified with American Walk/Away 40 microbe identification system. The antifungal sensitivity was detected with ETest. Results In this 323 strains of fungus, candida albicans was the main species, according for 63.8％, candidas tropicalis for 22.3％, and candidasglabrata for 7.4％.The resistance rate to 5 antifungals was ordinalhere:5FC 1.9％, AP 2.2％, KE 5.6％, IT 10.2％, FL 12.1％. Conclusion The candida albicans and candidas tropicalis was more common in clinical samples, and the positive rate of drug resistant strain against fungus increased gradually. So it is important to culture, isolate and identify the fungus from clinical samples, and do the antifungal sensitivity at the same time.Key words: Fungus;Antifungal sensitivity tests;ETest

    目前由于广谱抗生素、激素、免疫抑制剂、抗肿瘤药物的广泛使用，一些创伤性治疗如插管、导管等的应用，导致真菌的院内外感染机会日益增多，而且真菌对抗真菌药物的耐药性也日趋严重，有必要引起同行们的高度重视。本文我院2005年1月至2005年12月从临床各类标本中分离的323株酵母样真菌进行种群鉴定及药敏分析，现报道如下。

　　1  材料和方法

　　1.1  菌株来源  2005年度我院各科送检的各类标本3 140份。其中痰标本589份，纤支镜冲洗液139份，中段尿705份，血液标本1 497份，粪便标本98份，伤口分泌物标本112份。

　　1.2  试剂和仪器  广州市迪景微生物科技有限公司生产的沙保氏培养基、RPMI真菌药敏平板，美国BD公司生产的BACTEC血液需氧培养瓶，美国DADE公司生产的PYID酵母菌鉴定板及配套的真菌鉴定培养液，瑞典AB BIODISK原装进口ETest法药敏试条；美国DADE公司walk/Away 40微生物全自动鉴定仪、美国BD公司生产的BACTEC 9120全自动血液培养仪和BD CrystalSpec 比浊仪，上海求精生化试剂仪器有限公司生产的50 μl～250 μl加样器。

　　1.3  方法  痰、纤支镜冲洗液、中段尿、粪便及伤口分泌物直接接种于沙保氏平板、血液做真菌培养则先加入到血培养瓶中再放置血培养仪中培养，有阳性提示再转种沙保氏平板，生长菌落经涂片染色镜检证实为真菌则分纯培养，纯种菌落用鉴定板配套培养液调匀经比浊仪测定为0.5麦氏浓度菌液做ETest药敏试验，之后再把菌液调到2.0麦氏浓度，用加样器每孔100 μl加至RYID酵母菌鉴定板，最后上机鉴定及报告。

　2  结果

　　从3 140份临床标本中共检出真菌323株，其中痰标本179株(55.4%)、纤支镜冲洗液56株(17.3%)、中段尿58株(18.0%)、血液13株(4.0%)、粪便12株(3.7%)、伤口分泌物5株(1.6%)。菌群构成比以白色念球菌最多，具体见表1。323株真菌对5种常用抗真菌药都有不同程度的耐药，具体见表2。

　　表1  检出真菌种类菌种　略

　　表2  323株酵母样真菌的ETest试验结果(略)

　　3  讨论

酵母样真菌作为正常菌群的一部分，在人的呼吸道和肠道可少量存在，而当人体的免疫防护系统由于疾病或医源性干扰而损害，它可侵犯组织，对患者生命产生威胁，特别是血液的真菌感染。大多真菌感染都是混合感染或继发于其他细菌感染，治疗困难，故真菌的检测及药敏试验有十分重大的意义。本文研究结果显示，323株酵母样真菌中，白色念珠珠菌所占比例最高，为63.8%，其次是热带念珠菌占22.3%，此与沈翠芬［1］等报道类似。从总的鉴定结果可以看出所检出的致病真菌10余种，这与其他一些杂志报道相近，而从菌株来源上看，下呼吸道标本(痰和纤支镜冲洗液)所占比例最高，共达72.7%，真菌作为条件致病菌在上呼吸道可少量存在，但是由于广谱抗生素、免疫抑制剂等的大量使用，使局部的菌群失调，真菌过度繁殖成了更难治疗的致病菌。肠道的真菌致病也是同样的道理，所以真菌培养阳性可提示临床调整用药治疗的方向。从表2药敏试验结果可以看出，酵母样真菌对FL、IT和KE的耐药率较高，分别为12.1%、10.2%和5.6%，可见在体外药敏试验中FL耐药率最高，但据资料［2］记载，FL在体外抗真菌作用不及KE，但在体内抗真菌作用比KE强10倍~20倍，且不良反应较其他抗真菌药低，所以临床用药时应综合考虑，并且有一点必须注意，该三者抗真菌药存在一定的交叉耐药现象。而AP和FC的耐药率尚较低，为2.2%和1.9%，与许晓文［3］报道接近，应该为抗真菌治疗疗效较好的药物，然而这两者也各有一些不足之处，FC的抗真菌谱比较窄，单用效果不如AP，而且酵母样真菌易产生对FC的耐药性；AP则因其毒副作用大而仅在严重的真菌感染时才考虑其为首选抗生素。目前还有AP脂质体剂型，毒副作用明显低于AP，机体耐受性好，使用量可提高，但是价格昂贵也限制了它们的普遍应用。所以临床一定要加强对真菌致病的检出、鉴定及药敏检测，再结合实际情况选择合适的药物用于治疗。另外，本次研究采用的药敏试验方法是ETest法，该方法简单易行，无需特殊条件，王小丽等［4］这种方法与美国国家临床实验室委员会(NCCLS)提供的M27A方案做过比较研究，证实真菌ETest药敏试验方法是准确可靠的，值得各一般医疗单位推广使用。

 

作者：林楚怀，黄爱伟《实用医技杂志》

　　参考文献：

　　［1］  沈翠芬, 张晓祥. 临床标本的真菌培养和药敏分析［J］.中华医院感染学杂志, 2003,13(4):383384. 

　　［2］  向继洲. 药理学［M］. 第1版.北京:科学出版社,2003：500501. 

　　［3］  许晓文. 院内150例真菌感染及其耐药性分析［J］.中华微生态学杂志, 2005,17(2):141142.  

［4］  王小丽, 钟有添. 两种重要抗真菌药敏试验的比较研究［J］.赣南医学院学报, 2004，24(6):110111