铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶检测及其对20种抗生素的耐药性分析

【摘要】  目的 了解佛山地区铜绿假单胞菌临床分离产诱导型β内酰胺酶及其耐药性。方法 采用美国DADE产Micro Scan Auto Scan-4型微生物分析仪及其NC21鉴定及药敏板和符合NCCLS标准的Ver Sion 22分析软件，对128株铜绿假单胞菌检测产诱导型β内酰胺酶和对20种抗生素的敏感性。结果 （1）铜绿假单胞菌对头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦、环丙沙星、阿米卡星、头孢吡肟、亚胺培南的敏感性高达57.0%~80.0%之间。妥布霉素、哌拉西林、庆大霉素次之，而其他头孢菌素敏感性低下。（2）128株铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶者115株（89.8%），在产诱导型β内酰胺酶菌株中，哌拉西林/三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、安曲南诱导铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶的出现率为53.9%~80.0%。（3）产诱导型β内酰胺酶株对哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、妥布霉素等抗生素的敏感性显著高于不产诱导型β内酰胺酶株，而氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明的敏感性则完全相反（P＜0.05）。结论 佛山地区抗生素诱导铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶率较高，哌拉西林/三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、安曲南是强诱导剂，对于产酶菌株可选择环丙沙星、阿米卡星或联合使用耐酶的抗生素。

【关键词】  铜绿假单胞菌；诱导型β内酰胺酶；抗生素；抗药性

    ［Abstract］  Objective  To investigate the pseudomonas aeruginosa isolated from Qingyuan hospitals which produce inducible β-lactamase and their bacterial resistance.Methods  128 pseudomonas aeurginosa produce inducible β-lactamase and the susceptibility to 20 antibiotics were performed by Micro Scan Auto Scan-4 and plate NC21which was produced in USA,Ver Sion 22 analysis software according to the guidance of NDDLS was used.Results  (1)In the 128 pseudomonas aeurginosa,the sensitive percentages to Ceftazidime,Piperacillin/Tazobactam,Ciprofloxacin,Amikacin,Cefepime,Imipenem carieties from 62.6%to 80.0%,other antibiotics had less susceptibility.(2)115 strains inducible β-lactamase in 128 pseudomonas aeruginosa(89.8%),which induced by Piperacillin/Tazobactam,Ceftazidime,Imipenem rates were from 64.3% to 86.1%.(3)115 strains inducible β-lactamase sensitive percentages to Piperaciuin/Tazobactam,Amikacin,Cefepime,Ceftazidime,Ciprofloxacin and Tobramycin were significantly higher than those non-inducible β-lactamase,but the sensitive percentages to Ampicillin/sulbacatam,were just on the contrary.Conclusion  The rates of antibiotics inducing pseudomonas aeurginosa produce inducible β-lactamase are high in Qingyuan hospitals,Piperacillin/Tazobactam,Ceftazidime,Piperacillin and Aztreonam were strong inducer,Ciprofloxacin,Amikacin or other anti-enzyme antibiotics can be chosed for bacteria which produce enzymes.

    ［Key words］  pseudomonas aeruginosa；inducible β-lactamase；antibiotics;drug resistance

    铜绿假单胞菌是医院感染的主要致病菌，已居重症监护病房革兰阴性杆菌感染首位［1］，与其特殊的耐药机制有关。铜绿假单胞菌对多种抗生素耐

    药，主要与其外膜通透性下降和产生Ⅰ型诱导型头孢菌素酶（即AmpC酶）对β内酰胺酶类抗生素广泛耐药，并且不为酶抑制剂克拉维酸所分解，但各地报道的产酶率不尽相同。为了解佛山地区铜绿假单胞菌临床分离株产诱导型β内酰胺酶的情况及其耐药性，我们采用美国DADE产Micro Scan Auto Scan-4型微生物分析仪检测了128株临床分离的铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶情况，并对其耐药性进行分析，现报告如下。

    1  材料与方法

    1.1  菌株来源  2006年4月～2008年6月我院所在地佛山市范围，门诊和住院患者标本中分离的铜绿假单胞菌128株，其中痰液中87株，尿液中19株，伤口分泌物8株，咽拭子8株，穿刺液5株，血液1株。

    1.2  仪器和试剂  美国DADE产Micro Scan Auto Scan-4型微生物分析仪及其NC21鉴定板（B1017－135），NC21鉴定板上含有20种抗生素的不同MIC浓度。

    1.3  药敏试验  参照Auto Scan-4型微生物分析仪按操作说明进行，仪器自动分析报出20种抗生素MIC浓度，药敏结果判定符合NCCLS 1999年标准。以敏感（S）、中介（I）、耐药(R)报告结果。

    1.4  诱导型β内酰胺酶检测  符合NCCLS标准的Ver Sion 22分析软件的专家系统对待测菌株自动检测诱导型β内酰胺酶结果［2］。

    2.1  128株铜绿假单胞菌对20种抗生素的药敏情况  见表1。表1  128株铜绿假单胞菌对20种抗生素的药敏情况

    2.2  铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶检出及耐药情况  128株铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶者115株，占89.9％，不产诱导型β内酰胺酶者13株，占10.2％；产诱导型β内酰胺酶者有16株来自重型监护病房（14.3％），不产诱导型β内酰胺酶者有5株来自重型监护病房（38.5％），两者差异显著（χ2=5.13,P<0.05）。铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶株对哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、妥布霉素等抗生素的敏感性显著高于不产诱导型β内酰胺酶株（表2）。表2  铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶株与不产诱导型β内酰胺酶的耐药情况比较注：χ2值和P值是S的比较结果

    2.3  115株产诱导型β内酰胺酶铜绿假单胞菌中抗生素诱导产诱导型β内酰胺酶出现率  见表3。表3  抗生素诱导铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶

    3  讨论

    AmpC酶属于Ⅰ类β内酰胺酶，其合成往往与β内酰胺酶类抗生素存在有关，铜绿假单胞菌在正常情况下，只产生少量AmpC酶，而当有诱导作用的β内酰胺酶类抗生素存在的条件下，AmpC酶的产量可以明显增加100～1000倍之间，故又叫做诱导酶。各地报道铜绿假单胞菌产诱导酶检测率并不一致，石家庄侯天文等报道为57.5％［3］，上海蒋燕群等报道为92.9％［4］，与本文报道相近。哌拉西林/三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、安曲南是诱导铜绿假单胞菌产酶的强诱导剂，临床在联合用药时应避免与上述抗生素联合。

    从本组结果来看铜绿假单胞菌对头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦、环丙沙星、阿米卡星、头孢吡肟、亚胺培南的敏感性高达57.0％～80.0％之间。妥布霉素、哌拉西林、庆大霉素次之，而其他头孢菌素敏感性低下。铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶株对哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、妥布霉素等敏感性显著高于不产诱导型β内酰胺酶株，而氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明的敏感性则相反，与有关报道有所不同［2］，其原因可能是不产酶株多来自重症监护病房，与抗生素的过度使用有关。头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦敏感性高，同时又是强诱导剂。产诱导型β内酰胺酶的耐药特点是对酶抑制剂不敏感，对β内酰胺酶类抗生素耐药或潜在性耐药，头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦诱导产诱导型β内酰胺酶时，即使药敏处于敏感时使用也要慎重。环丙沙星、阿米卡星可作为治疗由铜绿假单胞菌引起感染的选择性药物，以氨基糖苷类抗生素为主以提高对细菌外膜的通透性，联合使用耐酶的抗生素，达到有效控制感染的目的。

无论是否产诱导型β内酰胺酶，铜绿假单胞菌对亚胺培南的敏感性都较以往报道偏低［1，3，4］，近年来铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率有增加趋势，1994年为6％，1996、1999年都均为20％［5］，过度应用亚胺培南药物抗感染是医院患者铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要诱因，产生金属β内酰胺酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要机制之一，金属β内酰胺酶不仅对内酰胺酶抑制剂的敏感性差，而且能够水解碳青酶烯类在内的一大批内酰胺酶类抗生素。铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药问题值得引起重视。

 

作者：张耀辉《中华现代中医学杂志》

  1 Dai LR,Xiang YH,Liu Y,et al.Resistance surveillance of gram-negative bacilli in intensive care units using etest.Chin J Med Lab Sci，1999，22（2）：77-79.

2 蓝海丽，孙伯良.全自动微生物鉴定分析仪检测诱导型β内酰胺酶的临床应用.中华医院感染杂志，2002，12（2）：155-156.

3 侯天文，尹晓琳，许素菊，等.铜绿假单胞菌产生β内酰胺酶表型检测及其药敏分析.中华微生物学和免疫学杂志，2002，22（4）：426.

4 Jiang YQ,Wang JQ,Chen SH,et al.Detection of inducible β-lactamase of gram-negative bacteria by double disks test.Shanghai J of Med Lab Sci,1999,14(3):142-144.

5 Wang F,Zhu DM,Hu FP,et al.Surveillance of bacterial resistance in Shanghai .Natl Med J China,2001,81(1):17-19.