呼吸科病房肠杆菌科细菌耐药性分析及产ESBLs菌株的检出

【摘要】  目的 检测呼吸科病房肠杆菌科细菌的耐药性和产ESBLs的情况。方法 收集85株临床分离菌株采用MIC检测耐药性，采用筛选试验和确证试验检测ESBLs。结果 亚胺培南的敏感性最高，三代头孢的耐药性最高，ESBLs检出率为41.2%。结论 呼吸科病房肠杆菌科细菌产ESBLs比率较高，对三代头孢耐药率高，建议使用亚胺培南和酶抑制剂类抗生素。

【关键词】  肠杆菌科 耐药性 ESBLs

 

    随着现代医学的迅速发展和抗生素的广泛应用，细菌的耐药性问题日趋严重，呼吸科病房作为医院的主要科室病房，病原菌耐药现象尤为突出。其中，超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases,ESBLs）因其底物范围广，传播速度快，引起了广泛关注。肠杆菌科细菌是主要的产ESBLs菌，易引起医院感染的爆发流行。为了解呼吸科病房肠杆菌科细菌的耐药性及产ESBLs的情况，笔者收集了我院呼吸科病房2006年1月～2007年6月检出的肠杆菌科细菌85株，进行分析总结。

    1.1  菌株来源  从我院2006年1月～2007年6月呼吸科病房送检的痰液、尿液、血液、胸腹水和分泌物等感染性标本中，分离到肠杆菌科细菌85株，其中肺炎克雷伯菌30株，大肠埃希菌22株，铜绿假单胞菌20株，不动杆菌属6株，奇异变形杆菌2株，沙雷氏菌3株，嗜麦芽窄食单胞菌2株。

    1.2  质控菌株  由卫生部临床检验中心提供，包括大肠埃希菌（ATCC25922）和肺炎克雷伯菌（ATCC700603）。

    1.3  培养和鉴定及药敏试验方法  细菌培养按照《全国临床检验操作规程》第3版进行，采用英国SENSITITRE荧光快速微生物鉴定/药敏分析系统鉴定细菌和抗生素敏感试验，按照美国临床实验室标准委员会（NCCLS）2004版药敏指南为结果判断标准。

    1.4  初筛试验  按NCCLS初筛标准，在纸片法药敏试验中，只要符合下列任何指标:头孢他啶≤22mm，头孢曲松≤25mm，头孢噻肟≤27mm，氨曲南≤27mm，即为产ESBLs可疑菌株。

    1.5  纸片确证试验  用头孢他啶（CAZ,30μg/片）和头孢他啶加克拉维酸（CAZ/CLV,30μg/10μg）；头孢噻肟（FTX, 30μg/片）和头孢噻肟加克拉维酸(FTX/CLV,30μg/10μg),分别测量两种纸片单独及加克拉维酸的抑菌环直径，加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌环直径相比≥5mm可确诊为ESBLs菌株。

    1.6  统计学处理  对产ESBLs和非产ESBLs菌株进行χ2检验。

    2.1  产ESBLs阳性率  肠杆菌科细菌85株共检出产ESBLs菌35株，产酶率41.2%。其中，肺炎克雷伯菌产酶株14株（产酶率46.7%），大肠埃希菌产酶株9株（产酶率40.9%），铜绿假单胞菌产酶株8株（产酶率40%），不动杆菌产酶株2株（产酶率33.3%），其余产酶株为变形杆菌1株，沙雷氏菌1株。

2.2  产ESBLs菌与非产ESBLs菌药敏结果比较  采用微量稀释法检测临床常用18种抗生素的最低抑菌浓度（MIC），结果表明产ESBLs菌的MIC均高于非产ESBLs菌，对β-内酰胺类抗生素有较高的耐药率，产酶菌对18种抗生素的耐药率均明显高于非产酶菌。见表1。表1  产ESBLs菌（n=35）和非产ESBLs菌 (n=50) 耐药率比较

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)又称氧亚氨β-内酰胺酶,是以能灭活窄谱和广谱头孢菌素、单环类抗生素及抗G-杆菌青霉素等抗生素为特征的β-酰胺酶，属于Ambler分类的A类，按Bush分类属2be群［1］，大多数是TEM-1、TEM-2、SHV-1酶的突变体。自1983年在欧洲首次发现，世界各地均有产ESBLs菌流行的报道。研究表明ESBLs多由质粒介导，能通过接合、转导和转化等方式使耐药基因在菌属间广泛传播，有较广的水解底物谱。ESBLs主要由肠杆菌产生，以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为代表，本次调查ESBLs阳性率为41.2%，与一些地区报道的结果略有差异［2］。产ESBLs菌株往往有多重耐药现象，ESBLs的耐药基因编码经常与其他的耐药基因联合而使耐药性更加复杂。例如，与氨基糖苷类及磺胺类药物的耐药基因联合，而同时出现对氨基糖苷类及磺胺类药物耐药［3］。本次研究结果表明产ESBLs菌株除对亚胺培南和阿米卡星的耐药率相对较低外，对三代头孢菌素类、单酰胺类（氨曲南）及广谱青霉素类（哌拉西林）均呈高度耐药。林尤仕等推荐使用碳青酶烯类（如亚胺培南）、β-内酰胺酶类抗生素加酶抑制剂、头孢类抗生素（如头孢西丁）、其他类型的抗生素（阿米卡星）等治疗产ESBLs菌引起的感染［4］。产ESBLs菌株体外药敏试验显示并非对所有青霉素类及头孢类抗生素耐药，但NCCLS规定上述抗生素及单环β-内酰胺类抗生素均应报告耐药。调查中发现，同一菌株常会出现一定时期的爆发流行，应引起重视。可定期进行病房空气消毒和院内环境消毒，强化护理清洁工作，减少致病菌传播。已感染患者应及时进行细菌鉴定和药敏试验，合理使用抗生素，并对ESBLs进行动态监测，对临床抗感染治疗具有重要意义。

作者：杜海燕《中华医学实践杂志》

  1 朱卫民，钱元恕.β-内酰胺酶动力学研究进展及临床意义.国外医药·抗生素分册，1998，19(6)：445.

2 马越，李景云，张新妹.2002年临床常见细菌耐药性监测.中华检验医学杂志，2004，27：38-45.

3 王力红，石海鸥，张京利.重症监护病房医院感染前瞻性研究.中华医院感染学杂志，2002，12（4）：268-270.

4 林尤仕，陈海.临床分离细菌耐药性监测及治疗对策.中国热带医学，2003，3（2）：208-209.