1182株念珠菌感染特性及耐药性分析

【摘要】  　　目的 探讨念珠菌感染的特点及耐药性情况，为临床合理选用抗真菌药物提供实验室依据。方法应用回顾性调查分折的方法，对我院3年间住院病人、门诊病人标本分离的1182株念珠菌进行统计并对常用抗真菌药敏试验结果进行分折。结果分离出的念珠菌以内科系统为主，共分离出833株(占70.47%)；检出真菌最多的部位是呼吸道，占真菌标本的76.39%；其种类以白色念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌为主，分别占72.42%、13.45%和10.07%；药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。结论 加强临床真菌分离菌株对抗菌药物耐药性的关注、根据药敏试验合理应用抗真菌药物十分重要。

 

【关键词】  念珠菌;感染特性;耐药性

 

　　1182 The Stub beads germ infection characteristic and bear a medi cine analysis

 

　　Zhong Xiaoyan,Chen Huiyu,He Jianing，et al

   

　　Mian Yang chinese medicine medicine Gao Dengs's junior college in the Si Chuan,621000 ,China

   

　　【Abstract】 Objective  To investigate the characteristic of Candida infection and examine the drug resistance condition, so as to provide assistance to the reasonable use of antifungal agents clinically.  Methods   To analyze the status of drug resistance of 1182 strains of Candida, which were isolated from inpatients and outpatients of our hospital in this three years. Antifungal agents susceptibility test was done to know the drug resistance.  Results   The Candida isolated in our hospital were predominant from medical unit, 833 strains of Candida were identified(accounted for 70.47%); The specimens where detected Candida were mostly from respiratory tract, accounting for 76.39%. The Strains of Candida albicans ,C. glabrata and C. tropicalis had the highest detection rates, accounting for 72.42%,13.45% and 10.07% respectively. The rates of susceptibility of Candida to Amphotericin B, Nystatin were more than 90%, and the rates of susceptibility to Terbinafine was only 6.3% for Candida albicans, but 100% for C. tropicalis.  Conclusion    Pay more attention to the drug resistance to the Candida isolated from the clinical. Antifungal agents should be selected reasonably according to the result of drug susceptibility test.

   

　　【Key words】  Candida  infection；Characteristic；  Drug resistance

 

　　近年来，随着广谱抗生素长期、联合使用及频繁更换药物，易造成细菌耐药和菌群失调［1］。皮质类固醇、免疫抑制剂及各种侵入性诊断治疗的广泛应用，先进诊疗技术如器官移植等的推广，以及肿瘤放、化疗的影响，真菌感染无论是在发生频率还是在致病菌种方面都在不断增加［2］。真菌感染已成为白血病，淋巴瘤，免疫抑制，中心静脉插管，中性粒细胞减少，烧伤，低体重的早产儿，血液透析，骨髓或器官移植，胃肠道手术和机械通气等特殊人群的严重感染性疾病［3］。并且念珠菌对常用的抗真菌药物存在耐药菌株，给临床治疗带来很大困难。我们对临床标本分离的1182株念珠菌属的感染特型及药敏进行分析。

 

　　1  材料与方法

 

　　1.1  材料

 

　　1.1.1  标本来源  1182株念珠菌来自2005年1月至2007年12月我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。

 

　　1.1.2  仪器  VITEK-AMS 32 全自动微生物分折仪，法国Bio-Merieux公司制造。

 

　　1.1.3  试剂  YBC卡为Bio-Merieux公司配套产品，念珠菌chrom GA显色培养基(法国科玛嘉公司提供)，8种抗真菌药物：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬 (辉瑞公司提供)。

 

　　1.1.4 质控菌株  白色念珠菌ATCC 90029，购自卫生部临检中心。氟康唑可接受的抑菌环直径范围为28～39 mm。

 

　　1.2  方法

 

　　1.2.1 细菌分离  鉴定按《全国临床检验操作规程》［4］进行培养分离，分离所得念珠菌采用chromG A显色培养基或用VITEK-32 YBC卡鉴定到种的水平。

 

　　1.2.2  细菌药敏试验  采用2003年美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感性试验。Mueller-Hinton(MH)琼脂中补充2％葡萄糖和0.5mg／L美蓝［5］。酵母菌在无菌生理盐水中稀释，比浊至0.5号麦氏管浊度，酵母菌量约为1×106～5×106／ml，均匀的涂抹在4mm厚平皿培养基上，贴上药敏纸片后，放置35℃孵箱， 24小时判断结果。质控菌株同时进行K-B法药敏试验，结果符合CLSI质控要求。

 

　　2  结果

 

　　2.1  念珠菌分布的科室构成  1182株念珠菌分布在10多个科室，以内科系统为主，共分离出833株(占70.47%)；外科系统分离出171株(占14.47%)。分布构成见表1。

 

　　2.2  念珠菌的临床标本分布  念珠菌的感染来自临床各类标本。其中以痰标本为主，分离出903株(占76.39%)；生殖系分泌物分离出62株(占5.25%)；尿分离出51株(占4.31%)；口腔分泌物分离出32株(占2.71%)；其它标本分离出134株(占11.34%)。

 

　　2.3  1182株念珠菌的种类和对抗真菌药物的药敏结果  见表2：白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，分离出856株(占72.42%)；其次为光滑念珠菌，分离出159株(占13.45%)；热带念珠菌分离出119株(占10.07%)；其它类型念珠菌分离出48株(占4.06%)。药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。

 

　　表1  1182株念珠菌分布的科室构成（略）

 

　　3  讨论

 

　　3.1  念珠菌的感染特性  调查表明念珠菌感染的患者主要分布在呼吸、血液、ICU、消化等内科科室及儿科，尤其是呼吸科患者念珠菌感染所占比例高达26.31%，与一些有关报道［6］不同，原因可能是该病区的患者多为长期患病的老年人。老年人由于胸腺逐渐退化，T细胞减少，生理防御能力减退和组织器官萎缩等各方面的原因，易患感染性疾病［7］，加上第三代头孢菌素、激素和细胞药物的使用，易引起念珠菌感染。本组病例>50岁患者占78.24%，故真菌感染率升高,对呼吸道病人尤其要重视口腔护理［8］。其次是血液、消化、内科监护室、干部病房、儿科，主要是由于体弱、免疫力低下、病情较重，长期反复使用多种抗生素等因素，导致体内微生态的平衡紊乱，造成菌群失调，使真菌大量繁殖。由此提示临床对免疫功能低下者或长期使用抗生素者要特别注意预防和监测真菌感染，以利于及时治疗。

   

　　各种临床标本中，痰液标本检出率最高［8］，事实上痰液的细菌检测多为混合型感染，由于正常人的上呼吸道也存在少量的真菌，使检出率大于感染率。故我们应重视真菌的镜检规范化［9］，告知患者正确的留取痰液的方法。白色念珠菌是最常见的临床分离菌，其次为光滑念珠菌和热带念珠菌。白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，占72.42%，念珠菌已成为院内感染的常见病源菌之一,其中非白色念珠菌的比例明显升高，占27.58%。

 

　　表2  念珠菌对抗真菌药物的药敏结果（略）

 

　　3.2  念珠菌的耐药特性  抗真菌药的类型不同，对不同种真菌的体外抗菌活性有较大的差异［10］。我院采用两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲康唑、特比萘芬8种抗真菌药物。据药敏实验显示，制霉菌素、两性霉素-B、伊曲康唑、氟康唑对念珠菌比较敏感，它们的毒副作用依次为制霉菌素>两性霉素>伊曲康唑>氟康唑，传统的两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，可作为治疗念珠菌感染的常用药物。两性霉素B抗菌谱广，但副作用较大，故用药过程中要严密观察其肾毒性［11］；最近上市了几种伊曲康唑、两性霉素B衍生物（包括两性霉素脂质体、两性霉素胶体分散体、两性霉素脂质复合物）、卡泊芬净及伏立康唑等，这些药物不良反应少，且伏立康唑治疗念珠菌的疗效较两性霉素B好［12］为用药选择提供了更高的空间，并应根据药敏结果进行调整。氟康唑、伊曲康唑对白色念珠菌的敏感率分别是70.4%、79.8%，与相关报道一致［13］。光滑念珠菌对5-氟胞嘧啶、咪康唑、伊曲康唑、特比萘芬的耐药率分别是86.9%、67.2%、29.5%、45.5%，热带念珠菌对5-氟胞嘧啶、咪康唑、伊曲康唑、特比萘芬的耐药率分别是75.5%、81.5%、20.4%、0%。本院分离的念珠菌对5-氟胞嘧啶耐药率高达75.5%以上.由于光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑的耐药率分别为4.9%，29.5%，，推荐优先选择两性霉素B治疗，对重症患者可以联合用药，通常为两性霉素B联合5-氟胞嘧啶或氟康唑治疗［14］。白色念珠菌对酮康唑及其咪康唑的敏感率都低于50%，且存在40%以上的中介率。特比萘芬,对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。这些必须引起广大临床医生和临床微生物工作者的高度重视。氟康唑、伊曲康唑是近几年应用最多的抗真菌药物，由于毒性小，对念株菌尤其是白色念株菌有较好的敏感性，器官移植术后的预防和多数经验治疗中也是采取氟康唑［15］。对于抗真菌治疗，不合理用药亦较常见，抗真菌药物的滥用，使真菌耐药现象增加，掌握念株菌的感染及其药敏情况有助于临床医生合理用药。抗真菌药物体外药敏试验反应了真菌对药物的敏感性，临床上可参考S、I、R进行治疗，但伊曲康唑的MIC折点基于口服制剂对于黏膜念株菌感染制定，不适合用于注射侵袭性真菌感染，建议临床参考MIC值。随着抗真菌药物的大量使用，念株菌耐药性日趋严重。预防用药临床常有在抗生素使用同时加用抗真菌药，这种预防用药不仅造成药物浪费，还可导致耐药性产生。准确的药敏试验结果对合理筛选抗真菌药物及发现耐药菌株具有重要意义。临床一旦发生真菌感染，应尽早监测真菌的耐药性，按抗真菌药敏结果，进行抗真菌治疗，这是降低真菌感染病死率的关键。

 

作者：钟晓艳 陈慧玉 何加宁    作者单位：621000 四川省绵阳中医药高等专科学校　621100 四川省绵阳中心医院检验科

 

【参考文献】

  　　［1］ 王春，张晓瑜.老年患者医院内下呼吸道真菌感染相关因素分析［J］中国现代医学杂志,2006,16(5):115-117

　　［2］ Lin SJ,Schranz J,Trutsch SM.Aspergillosis case-fatality rate:systematic review of the literature.Clin Infect Dis,2001,32(3):358-366

　　［3］ 徐英春，王澎，陈民钧．辉瑞公司全球多中心酵母菌敏感性监测结果［J］．中国抗感染化疗杂志，2003，3(3)：187-190

　　［4］ 中华人民共和国卫生部医政司编.《全国临床检验操作规程》.（第二版）［S］.东南大学出版社出版发行.南京，1997，540-548

　　［5］ National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method for antifungal disk diffusion susceptibility testing of yeasts;proposed guideline［S］.NCCLS M44-P,2003,123：6

　　［6］ 常东，蒋伟，黄志红,等.真菌感染及耐药性分析［J］ .中华医院感染学杂志，2005，15(3)：345-347

　　［7］ 王曾礼.肺部真菌感染的诊治现状 呼吸系统疾病（上）［J］.新医学，2006，37（9）：58-59

　　［8］ 胡佩村，李婉霞，廖一平.呼吸内科下呼吸道感染的细菌分布及药物敏感分析［J］.中华医院感染学杂志，2006.16(6):113-115

　　［9］ 张秀珍，胡云建，陶凤蓉,等.临床细菌室必须重视真菌检测［J］ .中华检验医学杂志，2005，9，28(9)：888-889

　　［10］ 赵辉，徐英春，谢秀丽，等．4种抗真菌药物的体外敏感性监测［J］．临床检验及实验室设备，2005，7(2)：147-148

　　［11］ 李从荣，彭少华，李栋，等.深部真菌感染的临床调查与耐药现状研究［J］.中华医学感染学杂志，2002，12（7）：485-487

　　［12］ 王瑞礼，李若瑜，王爱平，等.医学真菌学-实验室检验指南［M］.北京:人民卫生出版社,2004.86-103,202

　　［13］ 罗玉珠,范毓松.196株念株菌的分离和耐药性分析,中国临床保健杂志,2004,7(6):426

　　［14］ 张坚磊.深部真菌耐药性的研究进展［J］.国外医学临床生物化学与检验学分册,2005,26(5):609-677

　　［15］ Linden PK,Coley K,Fontrs P,et al.Invasive aspergillosis in livertransp lantrecip ients:outcome comparison of therapy with amphoterician B lipid complex and a historical cohort treateewith conventional amphoterician B ［J］.Clin Infect Dis,2003,37(1):17-25