引起生猪疫情的猪链球菌分离鉴定检测报告

2005年6月下旬以来,四川省资阳、内江等地区相继发生了生猪疫情，我院检验科细菌室于7月21日收到由四川省疾病控制中心送来的患者和猪心、肝、肉等标本培养出来的未知细菌，立即进行病原菌分离鉴定，现报告如下：

                   材料和方法

一、材料

临床资料：7月21日，资阳、内江等地有近80多人急性发病，出现高热、头痛、全身中毒症状，重者出现中毒性休克、脑膜炎，最终死亡10余人。死者多数都是与生猪密切接触者。

二、方法

1、细菌分离：将从猪心、猪肝、人心、人血标本中培养出来的18株细菌转种血平板进行细菌纯培养，经35℃24小时培养后，菌落呈灰白色、细小、α溶血、易乳化。染色为革兰氏阳性球菌，呈单个或成双排列。

2、细菌生化鉴定：采用ATB rapid ID32 STREP快速链球菌鉴定系统（法国生物梅里埃公司提供）。用棉拭子将血平板上菌落刮下，用去离子蒸馏水配置成浊度相当于4个麦氏单位菌悬液（用ATB比浊仪测定）。直接接种55ul菌悬液于32项微量生化反应试条。36℃4—4.5小时需氧培养，用ATB仪进行鉴定分析。生化反应结果L-精氨酸（-），试卤灵-βD-吡喃葡萄糖苷（+），βD吡喃半乳糖苷（-），βD葡萄糖苷酸—（+），αD吡喃半乳糖苷（+），βD吡喃半乳糖苷-2环乙胺(-)，D核糖(-)，D甘露醇(-)，D山梨醇(-)，D乳糖（+），D海藻糖（+），D棉子糖（+），D蔗糖(-)，L-阿拉伯糖（+），D阿拉伯糖醇(-)，α环糊精（+），丙酮酸盐(-)，L-丙氨酰基-L-苯氨酰基-L-脯氨酸(-)，β奈酚胺（+），2-奈酚-βD-半乳糖苷(-)，焦谷氨酸-β-奈酚胺（+），6-溴-2奈酚-N-乙酰-βD-葡萄糖胺(+)，L-甘氨酰-L-色氨酸酶-β-奈酚胺(+)，马尿酸盐(+)，糖原(-)，芽霉菌糖（+），D-麦芽糖(-)，D-蜜二糖(-)，D-松三糖（+），甲基-βD-吡喃葡萄糖苷(-)，D塔格糖(-)，4-邻硝基苯-βD吡喃甘露糖苷(-)，脲素(-)。鉴定结果：猪链球菌II型（生化反应编码为23072563110,鉴定百分率为99.9%）。

3、药物敏感试验：采用ATBSTREP5链球菌药敏试条对鉴定出的猪链球菌进行药物敏感试验，用ATB分析仪进行药敏分析。首先将该菌配置成0.5麦氏单位菌悬液，取200ul于ATB血清肉汤培养基中，再取菌悬液于盛有抗生素的反应孔中（每孔加135ul），35℃24小时孵育。药敏结果：阿莫西林、氯霉素、克林霉素、红霉素、左氧氟沙星、青霉素、奎奴普叮/达福普叮、头孢噻肟、复方新诺明、万古霉素均敏感，四环素耐药。

                讨 论

猪链球菌引起的猪链球菌病属国家规定的二类动物疫病，是一种人畜共患传染病。链球菌分布广泛，常存在于健康的哺乳动物和人体内，在动物机体抵抗力降低和外部环境变化诱导下会引起动物和人发病。

在这次疫情中，我院首先从患者和生猪血液、脏器组织分离到猪链球菌II型，为四川省生猪疫情的流行病学调查提供了病原学依据。同时为猪链球菌感染性疾病的诊断、治疗、防控工作提供了重要实验室依据，也为临床微生物工作者对这些少见细菌的鉴定起到技术指导作用。

作者：刘华  喻华  周忠华  颜英俊   黄文方 四川省医学科学院.四川省人民医院检验科