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空气中优势真菌与儿童过敏性哮喘关系的研究



录入时间:2011-3-8 14:17:31 来源:中国知网

关键词:真菌;哮喘;儿童;免疫疗法
  【摘要】 目的 研究气传真菌与婴幼儿和儿童过敏性哮喘关系,及免疫治疗的疗效。方法 采用空气中曝片调查法和曝皿调查法,观察气传真菌的品种和数量;对住院的345例哮喘患儿进行过敏原皮试;对真菌变应原皮试阳性病例进行免疫治疗。结果 经1年的调查,曝片观察到的35 746个真菌孢子和曝皿观察到的1 188个菌落,分属于4个亚门60个种属,常见菌种有黑粉菌、交链孢菌、锈菌、枝孢芽枝菌、芽枝菌、皮思菌、大孢枝孢菌、黑曲菌、杂曲菌和烟曲菌。85例婴幼儿哮喘患儿,39例真菌变应原皮内试验阳性(45.9%),260例儿童哮喘患儿,108例皮试阳性(41.5%),总阳性率42.6%。阳性率与真菌数量无关。真菌过敏性哮喘患儿的发病无明显季节特征。108例儿童哮喘中的81例坚持免疫治疗,总有效率为88.9%。结论 气传真菌是小儿哮喘的重要致敏原;免疫治疗有一定疗效。
  The relationship between airborne fungi and allergic asthma in children  Dong Zongqi, Yu Chuntao, Shao Yuelan, et al. Wuhan Children′s Hospital, Wuhan 430016
  【Abstract】 Objective To study the relationship between the airborne fungi and allergic asthma in children.Methods Airborne fungi were isolated and identified by using gravitational precipitation method (sheet glass and culture plate of exposure) determination. Fungal allergen skin tests were performed on 345 children with bronchial asthma. Fungal immunotherapy was given to children who showed positive results on the skin tests.Results Observation of 35 746 grain of airborne fungi spores and 1 188 grain of fungi spores for one year revealed the following species of fungi: Ustilaginales, Aternaria, Uredinales, Clodoporium cladosporioides, Cladosporium, Pithomyces, Cladosporium macrocarpum, Aspergillus niger, Aspergillus versicolor and Aspergillus fumigatus. Thirth-nine of 85 infants and young children with asthma (45.9%) showed positive skin test and 108 of 260 older children with asthma (41.5%) were positive for the skin tests; total positive rate was 42.61%. Eighty-one in 108 cases of asthma completed fungal immunotherapy. Total effective rate was 88.9%.Conclusion The airborne fungi are important sensitization allergen for inducing asthma in children. Fungal immunotherapy is an effective method for treatment of asthma associated with fungi.
  【Key words】 Fungi  Asthma  Child  Immunotherapy
  过敏性哮喘的诱发因素主要是空气中的致敏原,其中气传真菌占有一定地位。掌握一个地区空气中致敏真菌的品种、优势菌种及其传播规律,对于研究儿童真菌过敏性哮喘的患病情况,针对过敏原进行免疫治疗,有重要的实用价值。我们对本地区气传致敏真菌的品种及其所引起的婴幼儿和儿童过敏性哮喘以及免疫治疗的疗效进行了观察,现将结果报告如下。
材料和方法
  一、气传致敏真菌的调查
  按全国统一的空气中曝片和曝皿调查法[1]。(1)空气中曝片调查法:将采样器置于三楼平台上,用洁净的25mm×75mm载玻片,在玻片中涂抹一层薄而均匀的透明软性凡士林粘附剂,每日上午10时将载玻片置于采样器中,24小时后取片,日复一日。取回玻片后,先将甘油琼脂微火熔化,待微热后立即滴在载玻片上,加盖22mm×22mm盖玻片,在显微镜下鉴定菌种并计数。(2)空气中曝皿调查法:采用10cm普通营养琼脂平皿,每月曝露室内、外各3个平皿,每次在空气中暴露4分钟,然后置室温或25℃恒温箱内培养,观察菌落并作单菌种鉴定。
  二、哮喘患儿真菌过敏情况调查
  调查345例住院哮喘患儿中的真菌过敏者。345例的诊断均符合婴幼儿哮喘和儿童哮喘诊断标准[2],其中有婴幼儿哮喘85例和儿童哮喘260例。按照皮肤过敏原皮试操作常规[3],对患儿进行多价和单价真菌变应原皮内试验,并用不含药物的稀释液作对照试验,按标准判读结果。真菌变应原浸液由北京协和医院提供。
表1 武汉地区气传致敏真菌(部分)的分布(曝片法)
真菌名称
孢 子 数 量(个/月)
合计
1月
2月
3月
4月
5月
6月
7月
8月
9月
10月
11月
12月
黑粉菌(Ustilaginales)
279
556
410
736
1 712
2 871
980
995
1 120
1 060
1 124
842
12 685
锈菌(Uredinales)
256
218
359
436
544
612
336
248
413
856
792
413
5 483
交链孢霉(Alternaria)
168
155
294
497
1 062
1 235
296
265
311
212
125
196
4 816
芽枝菌(Cladosporium)
35
28
96
235
367
425
98
112
325
561
642
451
3 375
皮思菌(Pithomyces)
112
103
135
215
656
754
104
258
234
286
184
118
3 159
大孢枝孢菌(Clodasporium)
46
39
104
385
646
432
51
44
15
0
88
71
1 921
黑孢子菌(Nigrospora)
61
55
11
22
0
57
62
114
96
311
123
87
999
蠕孢菌(Helmiinthosporium)
51
24
10
35
51
114
48
46
82
65
91
48
665
阜孢菌(Papularia)
59
35
37
54
25
31
76
3
52
74
56
49
551
附球菌(Epicoccum)
18
27
24
43
104
36
9
12
7
5
3
7
295
小球腔菌(Leptosphaeria)
28
8
15
0
21
19
22
54
16
28
3
1
215
弯孢菌(Curvularia)
9
7
6
5
10
11
25
31
42
20
19
8
193
匍柄霉(Stemphylium)
0
0
4
6
25
38
28
21
18
11
12
8
171
尾孢菌(Cercospora)
15
17
0
1
0
2
21
15
42
30
9
4
156
毛壳菌(Chaetomium)
12
11
0
15
21
13
30
0
11
4
0
12
129
矩孢贝壳菌(Mytilidion)
0
0
7
11
17
22
4
0
9
20
13
0
103
   表2 武汉地区气传致敏真菌(部分)的分布(曝皿法)
真菌名称
菌 落 数 量(个/月)
合计
1月
2月
3月
4月
5月
6月
7月
8月
9月
10月
11月
12月
交链孢霉(Alternaria)
8
7
6
8
36
50
17
25
19
38
27
9
250
枝孢芽枝菌(Cladosporium cladosporioides)
5
2
4
10
8
7
12
17
25
48
28
11
177
附球菌(Epicoccum)
2
2
8
1
9
2
8
25
8
4
1
0
70
黑曲霉(A. niger)
1
0
1
3
8
19
1
4
8
13
4
0
62
杂色曲霉(Aspergillus Versicolor)
11
5
4
2
2
8
5
3
6
8
4
3
61
烟曲霉(Aspergillus fumigatus)
1
1
5
8
7
12
1
9
9
5
2
0
60
共头霉(Syneephalastraceae)
1
0
4
5
4
10
3
3
9
5
8
2
54
毛霉(Mucor)
1
2
1
5
7
0
9
0
7
6
7
0
45
梨头霉(Absidia)
1
1
3
5
8
0
0
1
5
7
2
1
34
桔青霉(Penicillium citvinum)
1
2
2
1
6
1
0
2
3
1
0
5
24
荨麻青霉(Penicillium Urticae)
2
1
3
0
4
1
0
0
5
1
1
1
19
构巢曲霉(Aspergillus nidlans)
1
2
1
1
3
1
0
2
5
1
0
0
17
阿姆斯特丹曲霉(Aspergillus amstalodami)
1
1
2
2
5
1
0
0
1
2
0
1
16
匍柄霉(Stemphylium)
1
0
2
0
4
1
0
0
0
0
2
1
11
宛氏拟青霉(Paceilomyces varioti)
1
0
2
0
0
3
2
0
0
0
1
1
10
  三、免疫治疗[3]
  对真菌过敏的哮喘患儿按常规进行免疫治疗,并进行疗效观察。疗效判断标准见本刊儿童哮喘防治常规(试行)。
结果
  一、气传致敏真菌调查结果
  经1年的调查(1997年1月1日~1997年12月31日),曝片中共观察到35 746个真菌孢子,分别属于:子囊菌亚门15个属种627个;担子菌亚门2个科目18 168个;半知菌亚门25个属种16 920个。曝皿中观察到真菌1 188个,其中接合菌亚门3个属种133个菌落;半知菌亚门15个属种797个菌落。真菌和孢子合计60个品种(表1,2),其中按计数的多少,将5%~35%占有率的真菌视为优势菌,小于5%者为非优势菌,优势菌中按数量由多到少依次排序为黑粉菌、交链孢菌、锈菌、枝孢芽枝菌、芽枝菌、皮思菌、大孢枝孢菌、黑曲菌、杂曲菌和烟曲菌。非优势菌不一一列举,其中小窦氏菌和梨黑星菌是迄今为止国内罕见的。各类真菌的月分布情况大致为5~6月和10月为相对高峰期,其他月份都有一定数量真菌生长。
  二、哮喘患儿真菌变应原皮试结果
  哮喘婴幼儿85例中,有39例患儿对真菌过敏(45.9%),儿童哮喘260例中对真菌过敏者108例(41.5%),两组比较经卡方检验,χ2=0.494,P>0.05。用优势菌种和非优势菌种作抗原,分别给哮喘患儿作皮试,结果是,婴幼儿哮喘患儿中对优势菌过敏者31例次(36.5%),对非优势菌过敏者27例次(31.8%),两者比较χ2=0.419,P>0.05。儿童哮喘患儿对优势菌过敏者82例次(31.5%),对非优势菌过敏者68例次(26.2%),二者比较χ2=1.84,P>0.05。345例中的147例真菌过敏性哮喘患儿的发病季节和月分布差异无显著意义。过敏患儿均对多价真菌过敏,无一例对单一真菌过敏者。
  三、免疫疗法的治疗结果
  儿童真菌过敏性哮喘108例中的81例接受1年以上的免疫治疗(治疗组),其中临床控制20例(24.7%),显效23例(28.4%),好转29例(35.8%),总有效率88.9%;27例未接受免疫治疗,仍坚持常规吸入药物治疗(对照组),其中临床控制2例(7.4%),显效3例(11.1%),好转5例(18.5%),总有效率37.0%,两组比较χ2=29.79,P<0.001,差异有显著意义。
讨论
  1年来采用曝片和曝皿法观察到气传真菌35 746个孢子和1 188个菌落,平均每天能观察到101个真菌。除了极少数尚不能鉴定的真菌外,它们分属于半知菌亚门、担子菌亚门、子囊菌亚门和接合菌亚门等四个亚门的60个种属细菌。常见的菌种有黑粉菌、交连孢菌、锈菌、枝孢芽枝菌、芽枝菌、皮思菌、大孢枝孢菌、黑曲菌、杂曲菌和烟曲菌等10种。1年中的5、6月和10月为相对高峰期,但其季节性不如气传花粉明显。阴晴雨雪、风霜云雾、气压高低、日照时间长短等对真菌的生长有一定影响,但真菌孢子终年不断。通过气传致敏真菌的调查有助于了解本地区空气中真菌的含量与品种,对推断或监测人群中真菌变态反应的发病情况与发展趋势有非常重要的意义。对及时明确病因进行有效防治,避免成为终生痼疾,有实际应用价值。
  对于真菌过敏性哮喘的诊断,已经有一些较可靠的辅助诊断方法[4,5],但至今尚不能在国内普及应用。我们采用混合多价或单价真菌变应原浸液作皮内试验,患儿出现明显的阳性反应后,再为患儿作进一步的各种不同真菌变应原的分类皮内试验,结果提示,婴幼儿哮喘85例中39例对真菌过敏(45.9%),儿童哮喘260例中108例过敏(41.5%)。说明真菌与真菌过敏性哮喘的关系是明确的[6]。用优势真菌和非优势真菌分别为患儿作皮试,在阳性率方面未能证明它们之间有明显区别。其发病季节的分布亦不如气传花粉致敏病例那样四季分明。皮试阳性病例中无一例对单一真菌阳性者,说明具有变态反应体质的儿童不仅对某一种真菌过敏,同时说明某些不同种属的真菌变应原之间存在着交叉抗原性[7]
  过敏原免疫治疗是通过反复地给有IgE介导的过敏患者投用某种特定的抗原,以达到当患者自然暴露在抗原时不再发生过敏症状和炎症反应[8]。对真菌过敏性哮喘患儿,给予皮内注射多价真菌变应原浸液,观察哮喘临床症状的改善程度或多长时间不发作哮喘,作为监测免疫疗法是否有效,是比较方便实用的方法[9]。坚持1年以上的免疫治疗,对真菌过敏性哮喘患儿具有一定疗效,总有效率为88.9%,与对照组比较差异有显著意义(P<0.001)。有报道在注射免疫治疗中全身系统反应的发生率为2‰[10],本组病例中无一例发生不良反应。
  作者:董宗祈 余春涛 邵月兰 肖诗豹 黄静宁 杨黎 周华 徐俊 钟木香《中华儿科杂志》
  参考文献
  1 叶世泰,乔秉善,主编. 中国气传致敏真菌调查. 北京:科学出版社,1995.12-14.
  2  全国儿科哮喘协作组. 儿童哮喘诊断标准和治疗常规. 中华儿科杂志,1993,31:222-224.
  3  乔秉善,主编. 变态反应实验技术. 北京:科学出版社,1996.129-133, 176-180.
  4  Sukovatykh TN,Sukheil D.Diagnosis of allergy to mold fungi in children with bronchial asthma [Russian].Pediatriia,1991,(5):82-84.
  5  Koivikko A,Viander M,Lanner A.Use of the extended padebas RAST panel in the diagnosis of mould allergy in asthma children.Allergy,1991,46:85-91.
  6 Dill I,Niggemann B.Domistic fungi viable propagules and sensitization in children with IgE mediated allergic diseases.Pediatric Allergy Immunol, 1996,7:151-155.
  7  Szantho A,Osvath P,Horvath Z,et al.Study of mold allergy in asthmatic children in Hungary.J.Investigational Allergol Clin Immunol,1992,2:84-90.
  8  Nicklas RA,Bernstein,Blessing-Moore,et al.Practice paramaters for allergen immunotherapy.J Allergy Clin Immunol,1996,98:1001.
  9  Costa T,Placido L,Silva M,et al.Effects of immunotherapy on symptoms,PEFR,Spirometry,and airway responsiveness in patients with allergic asthma to housedust mites (D.pteronyssinus)on inhaled steroid therapy. Allergy, 1996, 51:238.
  10  Parke JW,Engler RI,Smith LI.Immunotherapy reactions to aeroallergen and venom immunotherapy.J Allergy Clin Immnol,1990,85:214.

 

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