血液增菌肉汤、双相血培养瓶与全自动血培养系统应用对比

1 材料和方法

　　1.1 材料

   

　　1.1.1 标本来源

　　本院2000年1月～2002年12月门诊及住院患者的血液及骨髓标本    

　　1.1.2 培养基

　　法国生物梅里埃公司的miniVITAL专用需氧血培养瓶、上海奥普生物技术公司的双相需氧血培养瓶、浙江军区后勤部卫生防疫检验所的血液增菌肉汤。   

　　1.1.3 仪器

　　法国生物梅里埃公司的miniVITAL全自动血培养系统及VITEK32全自动微生物分析系统。   

　　1.2 方法

  　成人采血5～10ml，婴幼儿采血1～3ml，骨髓采1～2ml，2000年1～12月标本449份注入血液增菌肉汤、2001年1～12月标本1001份注入双相需氧血培养瓶、2002年1～12月标本1028份注入miniVITAL专用需氧血培养瓶，分别按操作规程 ［2］  、miniVITAL全自动血培养系统及VITEK32全自动微生物分析系统操作说明培养、分离、鉴定。

　　2 结果   

　　2.1 分离菌株 类

　　增菌肉汤449份标本，阳性48份，阳性率10.69%，检出5属7种菌;双相瓶1001份标本，阳性245份，阳性率24.48%，检出9属12种菌（含苛养菌2种）;miniVITAL培养系统1028份标本，阳性228份，阳性率22.18%，检出11属16种菌（含苛养菌4种）。  见表1。

　　表1 增菌肉汤、双相瓶及miniVITAL培养系统检出菌株种类 （略）

    　　

　　2.2 阳性检出时间及污染率

　　增菌肉汤阳性检出时间最快24h，最慢168h;24h检出率2.08%（1/48），48h检出率27.08%（13/48）;污染率1.11%（5/449）。双相瓶阳性检出时间最快16h，最慢168h;24h检出率9.39%（23/245），48h检出率58.78%（144/245）;污染率0.60%（6/1001）。miniVIˉTAL培养系统检出时间最快2.5h，最慢168h;24h检出率60.53%（138/228），48h检出率89.04%（203/228）;污染率0.39%（4/1028）。

　　3 讨论

　　3.1 增菌肉汤、双相瓶、miniVITAL 培养系统的血培养阳性率分别 10.69%、24.48%、22.18%，分别检出5属7种菌、9属12种菌（含苛养菌2种）、11属16种菌（含苛养菌4种），说明双相瓶、miniVITAL培养系统比增菌肉汤 适于细    菌，特别是苛养菌生长。

3.2 由于双相瓶加入琼脂斜面，减少了转种环节，有利于细菌特别是苛养菌生长，因此血培养阳性检出时间较增菌肉汤有所加快，而miniVITAL培养系统采用同源荧光技术，以CO 2 生成、pH值改变、氧化还原电位变化所致荧光下降的程度反映微生物的生长，它可以15min判读1次，因而使血培养阳性检出时间 大提高，实验表明miniVITAL培养系统的24h、48h阳性检出率均远高于双相瓶及增菌肉汤。3.3 实验显示，由于采用了塑盖和胶塞结合的瓶盖工艺，使双相瓶、miniVITAL培养系统血培养污染率仅分别为0.60%、0.39%，而无此工艺的增菌肉汤血培养污染率则高达1.11%。总之，由于富含细菌，尤其是苛养菌生长所需的氨基酸、维生素及生长因子等营养素，含有可抗凝、抗补体、抗吞噬、拮抗某些抗菌药物的聚茴香脑磺酸钠，使双相瓶、miniVITAL培养系统比增菌肉汤更有利于各类病原菌快速生长;而采用塑、胶结合瓶盖可减少双相瓶、miniVITAL培养系统污染可能性;由于使用了同源荧光技术，自动侦测技术，miniVITAL培养系统阳性检出时间大大快于双相瓶及增菌肉汤。本次实验表明miniVITAL培养系统能高速、准确地检出包括苛养菌在内的 种病原菌，但成本较高，适于在省、市级的大、中型医院及条件较好的县级医院使用，双相瓶能较快、较准地检出病原菌，适于在 般县级医院使用，而传统增菌肉汤因其检出率低，检出速度慢而应逐步淘汰。

 

作者：郭 民 孟 伟

　　参考文献    

　　1 周贵民.努力提高血液细菌培养阳性率.中华医学检验杂志，1999，22:69-70.

　　2 叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程，第2版.南京:东南大学出版社，1997:475-548.