细菌生化试验——吲哚试验

   原理：细菌分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对位二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚。

培养基：邓亨氏蛋白胨溶液
试剂：常用下述两种。
1．欧立希氏（Ebrlich′s）吲哚试剂
对位二甲基氨基苯甲醛（P-dimethyl aminobenzaldehyde）   1g
纯乙醇                                              95ml          
浓盐酸                                              20ml
先以乙醇溶解试剂，后加盐酸，要避光保存。
2．Kovacs试剂
对位二甲基氨基苯甲醛                                5g    
戊醇（聚异戊醇）                                    75g
浓盐酸                                              25ml

方法：以接种环接种待试细菌的新鲜斜面培养物于邓亨氏蛋白胨溶液中， 37℃培养24～48小时后（可延长4～5天）。于培养液中加入戊醇或二甲苯2～3ml，摇匀，静置片刻后，沿试管壁加入试剂2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液体变红色者为阳性反应。

      也可将一指头大的脱脂棉，滴上两滴欧立希氏试剂，再在同处加滴两滴高硫酸钾（K2S2O4）饱和水溶液，置于含培养液的被检试管中，离液面约半寸，置烧杯内水浴煮沸为止，脱脂棉上出现红色为阳性。此法略繁，但省试剂且准确，因为将试剂加到液体中，吲哚和粪臭素均呈阳性，而用此法，只是吲哚（它能挥发）呈阳性反应。

      亦可以滤纸片浸湿1%的二甲基苯丙烯甲醛的10％浓HCl溶液，然后以接种环刮取一环琼脂的纯培养物涂布于该滤纸上。

      细菌涂印周围呈蓝色者为阳性，细菌涂印周围无色泽变化或淡黄色者为阴性。

厌氧菌用蛋白胨水
蛋白胨                  20g   
葡萄糖                  10g   
硫乙醇酸钠               1g  
Na2HPO4（无水）         2g
琼脂                     1g
蒸馏水                  1000ml
加热溶解，调整pH至7.4～7.6，过滤，分装小试管，15磅高压15分钟。

 

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