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志贺氏菌及其检验(下)



录入时间:2011-4-29 9:15:25 来源:食品伙伴网

二、中毒机制与中毒症状
1.致病性
志贺氏菌既可产生内毒素和外毒素。志贺氏杆菌是侵入性细菌,只需千个、百个、甚至几个就可能引起疾病发生,与大肠埃希氏菌不同。后者需要食入大量细菌才会引起中毒。菌体进入体内后侵入空肠粘膜上皮细胞繁殖,产生外毒素,菌体破坏后产生内毒素作用于肠壁、肠壁粘膜和肠壁植物性神经。
2.主要症状
潜伏期一般为10h~20h,短者6h,病人会出现剧烈的腹痛、呕吐及频繁的腹泻,并伴有水样便,便中混有血液,发热,体温高者可达40℃以上,有的病人出现痉挛。
3.中毒特点:
季节:多发生于7-10月。食品种类:主要是凉拌菜。中毒发生的原因:本菌携带者或食品加工、集体食堂、饮食行业的从业人员患有痢疾时,手时污染食品的主要因素。
三、检验     志贺氏菌检验程序
主要步骤:增菌    分离和初步的生化试验     血清学分型和进一步的生化试验
1 增菌:目前检验志贺氏菌还没有理想的增菌和分离培养基,一般采用直接分离的方法。但当样品中含有杂菌、数量较少时,应进行增菌。增菌常用GN肉汤或MM肉汤。以25g(mL)检样在225mL肉汤中于35~37℃孵育6h~8h,或30℃ 16~20h。 增菌培养时间可以视具体情况而定,当培养也出现轻微混浊时即应中止培养。
2 分离和初步的生化试验
分离:培养基有SS琼脂、 HE琼脂、麦康凯琼脂、EMB琼脂、DC琼脂、木糖赖氨酸去氧胆酸盐琼脂等。用于分离的鉴别培养基,一般不少于2个。将增菌培养物划线接种于上述平板上,经37℃16~20h,挑出典型菌落,进行纯培养及生化试验等。
志贺氏菌的菌落特征  SS琼脂、麦康凯琼脂、DC琼脂:不透明或透明的无色菌落。HE琼脂:形成蓝色菌落,中心不发黑。
挑选可疑菌落,接种三糖铁(TSI)琼脂和葡萄糖半固体各一管, 37℃18~24h,分别观察结果。若培养后TSI上层不产酸、下层产酸不产气、不产生硫化氢,发酵葡萄糖产酸不产气,无动力,可疑似志贺氏菌,应进一步做生化鉴定和血清学鉴定。
3 血清学分型和进一步的生化试验:
血清学分型:玻片凝集试验。先用四种多价血清(A群1型、A群2型、B群和D群)。根据群因子血清凝集结果,依次选用型因子血清检查。
进一步的生化试验:赖氨酸和鸟氨酸脱梭酶、西蒙氏枸橼酸盐、葡萄糖铵盐、pH7.2尿素、KCN、水杨苷和七叶苷水解。除宋内氏和鲍氏13型鸟氨酸酶阳性外,其余均为阴性。

Several media have been designed to selectively grow enteric bacteria and allow differentiation of Salmonella and Shigella from E. coli. The primary plating media shown here are eosin methylene blue (EMB) agar, MacConkey agar, ENDO agar, Hektoen enteric (HE) agar and Salmonella-Shigella (SS) agar.


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