蜡样芽胞杆菌及其检验

蜡样芽胞杆菌及其检验
Examination of Bacillus cereus

 

一、蜡样芽孢杆菌

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)食物中毒于1950年由Hauge首次报道于挪威，此后欧美许多国家都有陆续报道。本菌引起的食物中毒在我国亦屡有发生。蜡样芽孢杆菌食物中毒的机制比较复杂，一般认为是由活菌及其产生的肠毒素共同作用所致。该细菌为条件致病菌，当食品中细菌含量达到10⁶个/g时，人食入后可导致食物中毒发生。

nBacillus cereus is an endemic, soil-dwelling, Gram-positive, beta hemolytic bacteria that causes foodborne illness.

n"endemic" means exclusively native to a place or biota

nB. cereus bacteria are facultative aerobes, and like other members of the genus Bacillus can produce protective endospores.

nAn endospore is a dormant, tough, non-reproductive structure produced by a small number of bacteria. The primary function of most endospores is to ensure the survival of a bacterium through periods of environmental stress. They are therefore resistant to ultraviolet and gamma radiation, desiccation, lysozyme, temperature, starvation, and chemical disinfectants.

Variations in endospore morphology.

(1, 4) Central endospore     (2, 3, 5) terminal endospore      (6) lateral endospore

蜡样芽孢杆菌的形态、染色、生化及培养特性与普通培养下的炭疽杆菌极为相似，故又称之为“类炭疽”。

1.形态染色特性

本菌为革兰氏阳性大杆菌，大小为1～1.2 ×3～5µm，菌体两端较平整，短链或长链状排列。无荚膜，芽孢呈椭圆形，位于菌体中央或稍偏于一端。有鞭毛，可运动。

2. 培养特性

需氧菌，生长温度10～45℃，最适温度为28～37℃。适宜pH范围为4.9～9.3。对营养要求不高，在普通琼脂培养基上菌落为灰白色、不透明、边缘不整齐、表面粗糙，类似蜡滴状。在血液琼脂上，可形成浅灰色、不透明、扁平、边缘不整齐的毛玻璃样菌落，有β-溶血。在甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂上，本菌菌落为乳白色或淡粉色，扁平，表面粗糙，菌落背景呈紫红色，菌落周围环绕白色轮晕。在普通肉汤中生长迅速，可形成菌膜或菌环，振摇易乳化。

3. 生化特性

分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨苷和覃糖，不分解乳糖、甘露醇、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、肌醇、山梨醇和侧金盏花醇；靛基质阳性；MR试验阴性，V-P试验阳性；不分解尿素；KCN试验阳性；卵磷脂酶阳性；能利用枸橼酸盐；能还原硝酸盐；过氧化氢酶阳性；可液化明胶。

 

二、检验

常规检验法： GB/T 4789.14-2003    1、菌数测定 2、证实试验3、动物试验 4、血清学试验

1．菌数测定

无菌采取检样25g(mL)，用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液作10^–1～10^–5的稀释液，每稀释度各取0.1mL均匀涂布于选择培养基(MYP琼脂)，37℃培养12～20h，选择典型菌落数在30个左右者进行计数，蜡样芽孢杆菌在此培养基上菌落为粉红色，周围有粉红色的轮晕。计数后，从中挑出5个典型菌落作证实试验。根据证实为蜡样芽孢杆菌的菌落数计算出该平皿内的本菌数，然后乘以其稀释倍数，即得到每1g(mL)检样中所含蜡样芽孢杆菌的数量。例如，MYP平板上可疑菌落为25个，取5个鉴定，证实为4个，该平板样品稀释倍数为10⁴，则1g(mL)检样中蜡样芽孢杆菌数为：25×4/5×10⁴×10=2×10⁶