临床微生物检验质量控制要求(3)

　四、培养基的质量控制

　　用于各种临床标本中微生物分离、鉴定的培养基种类很多。以前，都由实验室自配，现在已有成品供应。无论成品培养基还是自制培养基，其质量好坏直接影响微生物检验结果的准确性，因此必须对培养基作以下三方面质控。

 

 

1 ．一般性状

　　培养基的一般性状包括外观、厚度、 pH 值等。刚配制的液体培养基，其外观应透明、清亮、无混浊、无沉淀，颜色符合要求。新鲜的固体培养基应具有特定的颜色，表面湿润但无水汽、平整、光洁无凹坑和气泡。整块平板厚薄均匀，一般厚度在 3mm ，但 MH 平板的厚度不得小于 4mm 。斜面的长度不得超过试管长度的 2 ／ 3 。应经常观察贮存培养基的质量是否合格。若试管内液体培养基液面降低，表明水分蒸发，培养基浓缩。当固体培养基发生颜色改变，表面干燥，出现裂纹或边缘的琼脂与平板或试管分离时，应不再使用。培养基的 pH 是细菌生长的重要条件之一，一般而言合格培养基的 pH 应在规定值上下 0.2 的范围内。

2 ．无菌试验

 

 

　　新制备的培养基要按批号随机抽取一定数量的样品作无菌试验。对于压力蒸气灭菌后倾注的固体培养基，抽样后放 35 ℃ ± 1 ℃ 温箱培养 24-48h ；灭菌后经无菌操作分装的液体培养基要全部放入 35 ℃ ± 1 ℃ 温箱内培养 24h ；对有些无需高压灭菌只需煮沸消毒的选择性培养基要取部分琼脂，放入无菌肉汤管培养 24h ：上述试验证实无细菌生长时才算合格。若有细菌生长，说明培养基制备过程中已受杂菌污染，除了寻找原因外，应不再使用。

 

3 ．细菌生长试验

 

　　所有的培养基在使用前除了做无菌试验外还必须做细菌生长试验以测定培养基性能是否符合要求。要用已知的标准菌株按照 NCCLS 推荐的方法作质控。质控所需的标准菌株分 2 种：一种是已知的可在某种培养基上生长并产生典型生物学性状的，对培养基中的某种物质产生阳性反应的菌株；另一种是用已知的不能在某种培养基上生长或对培养基中的某种物质产生阴性生化反应的菌株。表 2 列出 10 种常用固体培养基的质量鉴定标准及所需标准菌株。

 

 

 

　　无论是厂家的成品培养基还是实验室自制的培养基，都应经过上述三方面的检验才能证实其质量是否合格。厂家应将所做的试验内容形成书面的质量鉴定送交客户保存。实验室自行配制过程中应对上述鉴定内容有明确记载。此外还应对培养基配制原料的性状、批号、失效期以及配制过程各个环节的操作形成记录。

表 2 12 种常用培养基的质量鉴定