临床病原体检查的常用方法（3）

㈢其他病原体感染的检查

 

     1、真菌感染的检查

 

     真菌（fungus）为真核细胞微生物，按形态可分为单细胞和多细胞两大类。单细胞真菌对人体有致病性的主要有新生隐球菌和白念珠菌。多细胞真菌有菌丝（hypha）和孢子(spore)，菌丝伸长分支并交织成团，又称霉菌。浅部真菌，如皮肤癣菌感染，直接涂片显微镜检查可见菌丝及孢子，可简便、快捷地作出初步诊断。真菌的培养要求低、在普通培养基（如沙氏培养基）上能生长，但真菌繁殖一代时间较长，分离培养至少需要4周。根据真菌培养的菌落形态、菌丝和孢子、染色特点、生化反应可以进行鉴定。真菌的抗原检测可检查血清和脑脊液中隐球菌、念珠菌及假膜组织胞浆菌感染。分子生物学诊断在真菌感染的检查中应用较少，PCR与基因探针技术联合用于卡氏肺孢子菌感染的诊断有一定意义。

 

 

     2、寄生虫感染的检查

 

 

     检查出寄生虫病原体是确诊寄生虫感染性疾病的最直接依据。根据不同种类的寄生虫感染人体后的不同发育阶段和寄生部位，采集相应的标本，如血液、粪便、阴道分泌物、骨髓等，涂片检查虫卵、虫体、包囊等是目前最可靠的确诊方法。例如，血涂片检查疟原虫，粪便涂片检查各种蠕虫卵、肠道原虫的滋养体和胞囊，阴道分泌物涂片检查阴道毛滴虫滋养体。部分较大的虫体，如蛔虫、绦虫节片等肉眼可以识别。分离培养极少用，在阿米巴或弓形体感染时有一定意义。

 

     3、螺旋体感染的检查

 

 

     螺旋体（spirochete）是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。临床标本涂片在暗视野显微镜下观察到螺旋体的特殊形态和运动状态。例如，怀疑为梅毒患者的生殖器分泌物涂片，若暗视野显微镜下观察到有胞体细长、运动活泼、由8～14个密螺旋组成的螺旋体时，有助于梅毒的诊断。除钩端螺旋体外，其他螺旋不易分离培养，使鉴定较为困难。分子生物学诊断螺旋体感染有一定意义，用PCR扩增可检出10条以上的钩端螺旋体。

 

     4、支原体感染的检查 

 

    支原体（mycoplasma）是一类缺乏细胞壁、高度多形性的最小原核细胞型微生物。革兰染色时支原体不易着色，直接涂片检查无临床诊断意义，一般以分离培养进行鉴定。肺炎支原体和解脲脲原体分离培养需10d以上才能长出菌落，有时需20d或更长，不适合临床快速诊断。PCR结合核酸杂交试验与序列分析，可以敏感、快速诊断各类支原体感染。

 

 

     5、衣原体感染的检查

 

 

     衣原体（chlamydia）是一类专性细胞内寄生的原核细胞型微生物，主要包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肺炎衣原体。涂片检查可在被感染细胞的细胞质内查到包涵体，具有一定的诊断价值。免疫荧光染色检查被感染细胞内的衣原体抗原，可以快速诊断衣原体感染和分型。

 

     6、立克次体感染的检查 

 

    立克次体（rickettsia）是一类微小的杆状或球杆状的、除极少数外仅在宿主细胞内繁殖的微生物。免疫荧光染色可检查被感染组织标本中的立克次体抗原，PCR扩增产物分析可以敏感、早期诊断立克次体感染。