沙门菌显色培养基与普通培养基SS、HE的比对实验

 

 

　[摘要]  目的  比对沙门菌显色培养基与普通培养基在检测腹泻便时的敏感性差异。方法  将1000份腹泻便标本增菌后接种沙门菌显色培养基简称(CAS)和SS、HE沙门菌普通培养基做比对试验。结果  沙门菌在CAS平板上呈现特定型的红色菌落，非沙门菌呈现蓝色或无色菌落。1000份腹泻便标本中CAS阳性检出检验地带网率为1.6%,高于SS阳性检出率1.5%和HE阳性检出率1.4%。结论  采用CAS选择性平板分离沙门菌较易鉴别且直观，同时也可以克服因肉眼挑选带来的主观误差，本次试验CAS沙门菌的检出率优于SS、HE普通选择性培养基，适于腹泻标本中沙门菌的检测。

　　[关键词]  沙门菌；沙门菌显色培养基；沙门菌普通培养基

　　沙门菌是引起食物中毒和肠道腹泻的病原菌之一。在食物中毒等突发公共卫生事件中，在我国内陆地区沙门菌占首位[1]。因此，寻找一种快速准确的鉴定沙门菌的试验方法尤显重要。沙门菌显色培养基(CHROM Agar Salmonella, CAS)是一种新型培养基，由于添加了特异的显色底物组合可以更精确的反映出样品中含有的沙门菌[2]。为了了解其在实际工作中的优势特做如下比对试验。

　　1  材料和方法

　　1.1  材料

   　1.1.1  样本来源  选择2008年7～9月(东北腹泻流行季节)由吉林大学临床二院、吉林市医院肠道门诊送检的符合监测病例标准的腹泻病人的粪便或肛拭标本共1000份。

　　1.1.2  培养基  亚硒酸盐增菌液(SF)、沙门-志贺菌琼脂(SS、HE)和肠道综合双糖管及其肠杆菌科鉴定编码等培养基均购置北京陆桥生物技术公司；肠道菌生化鉴定卡API20E购置法国梅里埃公司；沙门菌显色培养基CAS产自法国科玛嘉，郑州博赛生物技术研究所分装；沙门菌诊断血清购置卫生部兰州生物制品研究所。以上试剂均在有效期内使用。

　　1.2  方法

　　1.2.1  标本的检测方法  肛拭样品检测按照GB／T17012-1997中相应操作规程进行。

　  1.2.2  菌株的筛选和鉴定  在CAS和SS、HE分离平板上挑取相应的疑似菌落接种肠道双糖鉴别生化管，经初筛符合者(甘露醇＋、葡萄糖＋、尿素－、蔗糖－、动力＋、电基质-、硫化氢＋)做沙门菌检验地带网血清玻片凝集试验和系统生化鉴别试验，如果生化符合、血清多价“O”、凝集的菌株再做单价凝集，按Kuffman white抗原表用“O”、“H”、因子血清或“H”位相诱导鉴定出完整抗原式，初筛排出的疑似菌株经氧化酶试验阴性后系统生化编码鉴定到种。

 

　　1.2.3  菌株接种培养  将鉴定出的16株沙门菌和非16株沙门菌接种在CAS培养基和SS、HE培养基上，经37℃24小时培养后观察菌落颜色。

2  结果

2.1  菌落培养情况

16株沙门菌和16株非沙门菌在CAS培养基上的菌落颜色见表1。在CAS平板上，沙门菌落显紫红色、大肠杆菌、阴沟杆菌、枸橼酸杆菌和宋内志贺氏菌菌落显蓝色，痢疾杆菌和变形杆菌显无色或灰白色。

 

　　2.2  标本的检测结果

 

　　1000份腹泻便CAS检出16株沙门菌检出率为1.6%；SS检出15株沙门菌检出率为1.5%；HE检出14株沙门菌检出率为1.4%。三种培养基检出结果类似，CAS培养基与SS比较(x2=0.082，P＞0.05)无显著性差异；CAS培养基与HE比较(x2=0.13，P＞0.05)无显著性差异。

 

　　3  讨论

 

　　在肠道门诊中由于粪便采样不规范、病人广泛服用抗生素及培养基的特异性有限等因素影响，传统分离方法的灵敏度有所降低。沙门菌在CSA显色平板上菌落都表现为检验地带网较易辨认的紫红色，而其他非沙门菌呈现蓝色或灰白色。说明该显色培养基对沙门菌有较高的特异性，易于辨认两种或两种以上混合的病原菌，可针对性的挑选沙门菌可疑菌落，避免因检测可疑菌菌落数量少或检测不够熟练而导致漏检的可能性。虽然CAS平板与SS、HE平板的检测结果无统计学差异，但CAS平板的沙门菌检出率高于SS、HE平板。

 

　　本次试验SS和HE平板对沙门菌检测的敏感性低于CAS平板的原因主要是标本中大量枸橼酸杆菌和复杂的肠杆菌所表现出的假阳性菌落的影响。由于沙门菌在CAS培养基上显示紫红色的菌落，那么在做食品检样时，就可以比较容易的区分沙门菌落和食物形成的类菌落似的残渣。

　　4  结论

 

综上所述，SS、HE平板仍是国内实验室普遍采用的沙门菌选择性平板之一，CAS平板与SS、HE平板适用于沙门菌的分离。但沙门菌在CAS平板上有易于鉴别、选择性好的特点，其优势还是远远大于普通培养基的选择性。特别是在混有沙门菌的混合菌和突发公共卫生事件的处理中，首选CAS平板还是会取得较好的分离效果。

　作者:吉林省吉林市船营区疾病预防控制中心 (张颖)  130000  吉林省吉林大学第二临床医院 (潘春枝)

　　参考文献

　　[1]何晓青.卫生防疫细菌检验.北京:新华出版社,1989.

　　[2]Olivir G,Patrick DIC Patrick B,et aI.Comparison of CHROMagar salmonella midium and hektoen entnric agar for isolation of salmonellae from stool samples.J Clin Microbiol,1999,37:762-765.