大肠杆菌目标蛋白的诱导及总蛋白检测（含T7表达系统如BL21菌株中的pET系列表达体系）：
诱导蛋白表达：
1．取过夜培养物50ul-200ul接种于5ml含抗生素的Universal瓶中
2．37度摇2小时左右
3．取一定体积的菌液做阴性对照，其余的加IPTG至终浓度为0.2mM（可变）（4ml培养基加80mM的IPTG10ul）
4．37度摇2小时左右
检测蛋白表达：
5．取100ul（或更多）培养物，用pH值为7.4的20mM Tris-HCl（或PBS 7.4）浓缩10倍或5倍。（菌体多时也可不浓缩）
6．加等体积的2倍上样液（Sampling Buffer），或1／9体积10倍上样液。（加上样液之前后最好将菌体尽量打散，可防止菌体不能完全破裂，还可加入1M的DTT至终浓度50mM防止加热时二硫键的形成。）
7．100度煮2-4分钟
8．12000rpm，离心1min（菌体破碎完全时也可不做）
9．取上清点样做SDS-PAGE
部分试剂：
1．蛋白上样buffer(2倍)（10ml）：
SDS 0.2g，溴酚蓝0.0006g，1M Tris-HCl (pH=6.8) 0.8ml，glycerol 1.5ml。
2．蛋白上样buffer(10倍)（10ml）：
SDS 1g，1MTris-HCl (pH=6.8)2.5ml，溴酚蓝0.003g，glycerol 4ml。
3．1M DTT（二硫苏糖醇）
3.09g DTT溶于20ml 0.01mol／l 乙酸钠，过滤除菌，分装，-20度储存。
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