浓缩果汁细菌检测方法

录入时间:2011-6-22 14:56:38 来源：互联网

范围：本法适用于浓缩果汁及浊汁中细菌总数的检测。浓缩果汁通过滤膜过滤，细菌被截留，而后将滤膜置于细菌总数选择性培养基中，培养确定细菌总数的数量。浊汁直接与平板计数培养基混合后培养来确定细菌总数的数量。

参考：GB/T 4789.2-2003

标准：无

试剂：

Millipore细菌总数选择性培养基

平板计数琼脂

乙醇（75%）

仪器器皿：

培养箱

净化工作台

灭菌Duran Schott 瓶

10毫升无菌移液管

Millipore过滤器

PALL 0.45μm滤膜

PALL 一次性无菌培养皿50×9mm，内置吸水纸

一次性无菌培养皿90×15mm，塑料

真空泵

菌落计数器

镊子

酒精灯

漏斗　

操作程序

全部工作应在已经紫外线杀菌15分钟及75%乙醇喷洒过的净化工作台上进行。

1清汁的检测

1.1用无菌移液管从无菌袋中吸取20mL果汁，置于盛有50mL灭菌水的样品瓶中，充分混匀。将一瓶细菌总数选择性培养基倒入50×9mm的一次性无菌培养皿内。

1.2用无菌镊子夹取一个滤膜边缘部分，正面向上置于灭菌过滤器上，将制备的样品倒入漏斗内，打开真空泵，当全部液体通过膜后，释放真空，用镊子把滤膜轻轻夹起，放于预备的培养皿内。

1.3将培养皿置于培养箱内，于30~35℃培养三天。

1.4全部的细菌总数用放大镜计数。此数目除以20即得出每毫升果汁中的细菌菌群数。

2浊汁的检测

2.1用无菌移液管吸取10mL已热处理过的果汁，分别备5个无菌培养皿内各加入2mL果汁，向每一90×15mm的无菌培养皿中迅速倾入平板计数琼脂约25mL，轻轻摇动，使果汁与培养基混合均匀。

2.2待培养基凝固后，将培养皿倒置放入培养箱内，于30-35℃培养三天。

2.3培养结束，进行计数，以每10mL样品报告结果。