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关于甘油菌种保藏



录入时间:2011-6-24 9:31:46 来源:互联网

 
用甘油+LB保存,离心培养的菌液,加入适量的灭菌甘油+LB。
 
摇瓶培养到对数生长期的菌液倒到灭过菌的50ml的离心管中,8000rpm离心10min,去掉上清液,在超净台上加灭过菌的15%甘油+LB 10-15ml,分装入冻存管中。
 
挑取细菌到LB培养基中过夜培养,取500ul的甘油和500ul的菌液在EP管中混合均匀,保藏即可,甘油的浓度是40%,
 
可以直接取1.5ml菌液,离心,加入1ml40%甘油即可。若菌量太少,可以在离心后倒掉上清液,再取一次菌液,离心。 
 
先配40%的甘油管,一定灭菌,然后把你的菌液加入等体积的就可以了,短时间的保存是没问题的。 
 
400ul 菌液 + 400ul 40%甘油-水(灭菌),混匀,-80°保存 
 
菌液和甘油混合后,最好速冻一下,然后直接-80度保存起来 

 

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