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支原体污染相关内容


录入时间:2011-6-28 15:01:01 来源:青岛海博

各国细胞库支原体污染的统计表
国家   受支原体污染(%)  报告年度
USA-FDA  15  1993(past 30 years)
USA-ATCC  15-20  1992
Japan-(IFO,RIKEN,JCR 80~30~22  1981 1987-19931998
Germany-DSM  36  1990-1994
Argentina  65  1987
Israel  32  1986-1993
China  95   1990
 
造成支原体高污染率的原因为: 
1.支原体size 0.1~0.8 um,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um) 
2.支原体污染时,没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化 
3.过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式 
4.细胞流通间缺乏品管,造成实验室间的相互污染 
5.研究或操作人员忽略污染问题 
 
支原体污染了来源: 
1.  已受污染的细胞 
2.  操作人员的疏失 
3.  已受污染的培养基、血清 
4.  操作环境不良、实验器具不洁等 
由于支原体为人体口腔中之正常菌丛,实验室之操作人员的污染亦可能为污染源,须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时,最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞株。但是若是坚持要作去除支原体污染,有以下几种方法,只不过结果会与原始的细胞特性有差异。
 
去除支原体污染: 
1. 抗生素处理:BM-cyclin(Roche),MRA(mycoplasma removal agent,ICN),Ciprofloxcin(Bayer),Enrofloxacin(Bayer) 
2. Nucleic acid metabolites:5-bromouracil,Hoechst 33258,bromodeoxyuridine 
3. Anti-sera 
 
预防与控制方面可从以下各点加强注意:
 设备方面: 
1.  使用已作支原体测试ok之细胞株 
2.  于另一隔离之区域操作未知是否有支原体污染之细胞 
3.  使用不添加抗生素的培养基培养细胞 
 检测方面:定期以标准的支原体检测方法检测细胞、培养基、血清、ddH2O有否被支原体污染。
 实验操作人员之无菌观念与无菌操作技术之要求

 

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