物理因素对细菌的影响
1.热力灭菌：
（1）干热灭菌：
干烤（160～170℃，2h）、焚烧（易燃、废弃物品）、烧灼（不易燃的物品，如取菌环、试管口）、红外线：0.77～1000mm电磁波,1～10 mm效应最强。
（2）湿热灭菌
巴氏消毒法：61.1～62.8℃ 30min；71.7 ℃15～30s’，后一种方法最常用。
煮沸法：100℃ 5min可杀死一般细菌的繁殖体，水中加入2%碳酸氢钠，沸点可达到105℃。
流通蒸汽法：100℃，15～30min，可杀灭细菌的繁殖体。
高压蒸汽灭菌法：高压锅---在103.4kPa（1.05kg/cm2、、15磅/英寸2）蒸汽压下，温度可达121.3℃，维持15～20min，可杀灭芽孢在内的所有微生物。
干热灭菌与湿热灭菌的比较：
穿透性；湿热穿透性强。
潜热；由气体转变为液体时释放热量。
菌体蛋白在液体中经加热易变性。
2.辐射杀菌法：
（1）紫外线（UV）：200～300nm（100+～380nm）;265～266nm杀菌作用最强;使一条链上相临的嘧啶形成二聚体。具有光复活作用，不能用紫外线制备灭活菌苗。紫外线穿透力差，只能用于空气和物体表面的杀菌。紫外线对人体皮肤、视网膜均有损伤。不能开着紫外线灯工作。
射线、X射线g（2）电离辐射：
（3）微波：11000mm的电磁波
3. 滤过除菌法：滤菌器（filtration）
薄膜滤菌器（0.25nm）、玻璃滤菌器（G1～G6）、石棉滤菌器（K、EK、EKS型）、Seitz滤菌器。适合于不耐热的液体（血清、细胞因子、抗生素、毒素等）及气体的滤过。
化学因素对细菌的影响
常用消毒剂：
酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂。
作用机理：
1、促进菌体蛋白质变性或凝固；
2、干扰细菌的酶系统和代谢；
3、损伤细菌的细胞膜
1%龙胆紫、2.5%碘酒、75%乙醇、0.1%新洁尔灭（红汞现在已取消）。
影响消毒剂灭菌效果的因素：
1、消毒剂的性质、浓度与作用时间--乙醇例外，70%乙醇消毒效果最好；
2、微生物的种类与数量；
3、温度；
4、pH；
5、有机物。
消毒剂对人体毒性太大，只能外用，不能口服或注射。
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