结核杆菌生长现象观察、抗酸染色

录入时间:2011-7-12 14:45:07 来源：青岛海博

分枝杆菌生物学特性观察

材料

结核分枝杆菌的培养物

方法

观察结核分枝杆菌在改良罗氏培养基（含蛋黄、甘油、马铃薯和天门冬酰胺等）上的菌落特点：呈干燥颗粒状，乳白色或米黄色，形似花菜心。结核杆菌12～24h繁殖一代，3～4W形成菌落。

抗酸染色法

原理

分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。

材料

酒精灯、玻片、结核病人痰液、石碳酸复红、盐酸酒精、碱性美兰等

步骤

1.取开放性肺结核病人的痰液涂片，自然干燥后，通过火焰固定。

2.初染：痰膜上加一小的方形吸水纸，在吸水纸上滴加石炭酸复红染液，在火焰高处徐徐加温至冒蒸气，并维持 5 分钟（注意切勿让染液沸腾或煮干），当染液蒸发减少时，需再加染液补充。待标本片冷却后水洗。

3.用 3% 盐酸酒精脱色，至无红色染液流下为止（反复2～3次，一般需要1～2min）水洗。

4.复染：用碱性美蓝复染 1 分钟，水洗，吸干，镜检。抗酸杆菌呈红色，背景及非抗酸菌呈蓝色