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肺炎支原体的培养


录入时间:2011-7-15 14:54:44 来源:青岛海博

一、标本采集
支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。
 
二、分离培养
1、支原体固体培养基接种法转动拭子将标本液体尽量挤出,用无菌滴管吸1~2滴接种在平皿上盖好,用L棒涂抹或倾斜转动平皿使标本均匀分布,置37℃孵育。
2、支原体半固体培养基接种法混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清、酵母浸液及青霉素后混匀,待冷却至37~40℃时,用无菌滴管吸取标本 0.5~1ml加入培养基中,充分混匀,凝固后置37℃孵育。
3、穿刺接种法:方法同细菌接种法。
 
三、结果观察 
  绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4d长出菌落,少数于1~2w方长出典型菌落,在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状,边缘不整齐。
 
四、附录
  糖酵解培养基(肺炎支原体培养基)
  基础培养基 70ml
  马(或牛血清) 20ml
  25%酵母浸液 10ml
  0.4%酚红 0.5ml 
  1%醋酸铊 2.5ml
  青霉素10000IU/ml 5.0ml
  调pH 7.8 

 

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