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猪繁殖与呼吸综合征病毒



录入时间:2011-8-12 9:21:37 来源:动物微生物学

      猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virusPRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病原。属动脉炎病毒科(Arteriviridae)动脉炎病毒属(Arterivirus)。

本病于1987年在美国西部首先发现,后来在加拿大、德国、法国、荷兰、比利时、英国、西班牙、希腊、澳大利亚等国都有报道。病毒在未分离鉴定之前,曾称本病为猪神秘病(MystcryswiIlc diseaseMSD)。又因患病猪的耳朵等处发绀变蓝,故又称“猪蓝耳病”(Blue-eared pig disease)。

一、生物学特性

病毒为圆形,直径为5060nm,含有2035nm的核衣壳,在氯化铯中浮密度为1.19gcm3;有囊膜,对乙醚、氯仿敏感;病毒基因组为单股正股RNA,分子量约1.5×106道尔顿。不凝集鸡、哺乳动物和人的O型红细胞。

二、抵抗力 

该病毒在外界环境中的抵抗力相对较弱,对高温敏感。在深冻组织中病毒可存活数年,但在4仅存活1个月,37存活18h56存活15min以内。在pH6.0时稳定,在pH5.0以下和pH7.0以上均易失活,将肉尸保存于418h仍能发现其中有活病毒。

三、抗原性 

PRRSV的欧洲毒株和美洲毒株之间抗原性有差异,但也存在一些血清学交叉反应。根据其基因遗传性和病原性的差异,分为美洲型(ATCC VR-2332)和欧洲型(LV)两个基因型。前者以ATCC VR-2332株为代表株,后者以Lelystad VirusLV)为代表株。Gilbert等(1997)建立了一种快速多联PCR法以区分这两型病毒的基因型。

四、 培养特性 

所有动脉炎病毒属病毒均能感染巨噬细胞,均能产生持续无症状感染,均有毒株变异性。PRRSV的欧洲分离株仅能适应于猪肺巨噬细胞,能出现细胞病变,在美国分离的ATCC VR-2332毒株,可在CL-2621传代细胞或Marc-145细胞上生长并致细胞病变。

五、致病性

本病毒可侵害任何年龄的猪,对其他家畜和动物还未见发病报道,但已发现野鸭等禽类可携带本病毒。妊娠母猪和哺乳仔猪受害最严重,生长猪和育肥猪感染后症状较温和。母猪怀孕后期受病毒感染后,病毒可经胎盘感染胎儿。怀孕母猪发生流产、早产,早产胎儿可比正常分娩提早6周;流产死胎数大量增加,可达50%以上,还有不少木乃伊胎。约有1%~2%的感染猪耳尖、四肢末端、尾巴及乳头呈蓝紫色,多发生于症状出现后57天,以耳尖变蓝为最常见(曾称猪蓝耳病)。母猪有的出现泌乳困难。耐过的母猪以后可重新怀孕,但窝产数和仔猪存活率下降。发病公猪主要表现为倦怠,嗜睡,精神状况下降。小猪发病后主要表现为呼吸困难,明显腹式呼吸和咳嗽等。断奶仔猪死亡率可达40%~100%。

六、微生物学诊断

采取病死猪的病料进行检查,其方法有以下几种:

(一)病毒分离培养与鉴定  用猪的肺、脾、死胎儿的肠及腹水、胎儿血清、母猪血液、鼻拭子和粪便等组织和病料分离病毒。

先将病料剪碎研磨制成1:10乳剂,经1500rmin离心30min,取上清液加双抗,然后再经0.22μm滤膜过滤,取滤液接种猪肺泡巨噬细胞培养,培养5d后,用免疫过氧化物酶法染色,检查鉴定肺泡巨噬细胞中的PRRSV。也可以将病料接种CL-2621Marc-145细胞单层上,观察细胞病变,并用间接荧光抗体染色法或中和试验法进行病毒鉴定。

(二)酶标抗体染色法  将采取的鼻粘膜、肺、气管、脾等组织进行冷冻切片,切片用丙酮固定10min,然后用过氧化物酶标记抗体染色(直接法),显微镜观察可见在支气管及肺泡中有许多上皮细胞感染PRRSV;在脾脏的红髓中也有大量病毒。

(三)荧光抗体染色法:将病料(或接种病料后的CL-2621细胞单层)冷冻切片丙酮固定,用间接法进行荧光抗体染色,然后以荧光显微镜观察,可在细胞内发现病毒。

此外,PCRELISA等技术亦用于本病的诊断

七、免疫与治疗

对本病目前尚无有效药物进行治疗。主要采取综合防制措施,加强管理,彻底消毒。严格检疫,切断传播途径。如果育成猪发生急性PRRS,可采用抗生素防止或减少继发性细菌感染,提高猪的成活率。目前多采用基因缺失苗或灭活苗进行免疫接种。

 

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