细菌呼吸酶类试验

1.氧化酶试验  氧化酶或称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。作氧化酶试验时，此酶首先使细胞色素C氧化，然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。本试验肠杆菌科阴性，弧菌科、非发酵菌阳性（除个别菌种外）、奈瑟菌属均阳性。

2.过氧化氢酶试验  黄酶系统的呼吸酶最后把氢交给分子氧而形成过氧化氢，过氧化氢对活细胞有毒，过氧化氢酶的作用是使过氧化氢分解为分子态氧。于半分钟内大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性。绝大多数细菌均可产生过氧化氢酶。但链球菌属的触媒阴性，金氏杆菌属细菌的触媒也阴性。

3.硝酸盐还原试验   硝酸盐还原试验包括两个过程：其一是在合成代谢过程中，硝酸盐还原为亚硝酸盐和氨，再由氨转化为氨基酸和细胞内其它含氮化合物；其次是在分解代谢过程中，硝酸盐或亚硝酸盐代替氧作为呼吸酶系统中的终末受氢体。硝酸盐还原的过程可因细菌不同而异，大肠埃希菌等仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐；假单胞菌等能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮；有的细菌则可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵。硝酸盐或亚硝酸盐如果还原生成气体的终末产物如氮或氧化氮，就称为脱硝化或脱氮化作用。硝酸盐还原试验系测定还原过程中所产生的亚硝酸.接种硝酸盐培养基后于35℃培养1~4d，将硝酸盐还原试剂甲液和乙液的等量混合液（用时混合）0.1ml加于试管内，立即或10min内观察结果。（1）出现红色为阳性。（2）如欲检查有无氮气产生，可于培养基内加1只小倒管（Durham管），如有气泡产生，表示有氮气生成。（3）如加入硝酸盐还原试剂不出现红色，需检查硝酸盐是否被还原，可于原试管内再加入少许锌粉，如出现红色表示硝酸盐仍然存在。若仍不产生红色，表示硝酸盐已被还原为氨和氮。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐，铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌等可产生氮气。

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