食源性致病菌检测技术（3）

变形杆菌

    变形杆菌是肠杆菌科的一类细菌。在一定条件下可引起各种感染与食源性疾病。此菌在食物中能产生肠毒素。致病食物以鱼蟹类为多。近年来，变形杆菌食物中毒有相对增多趋势。 

1．常规分离鉴定技术

    将获得的标本迅速接种于血平板、EMB、SS等平板上以37℃培养18-24小时，多数菌株在血平板、EMB平板上呈扩散蔓延薄膜状生长，并使血平板变黑发臭。在SS或5%琼脂平板上可形成单个菌落。方法见卫生部《变形杆菌食物中毒诊断标准和处理原则》WS/T9-1996。 

    交互吸收试验：将不同标本中分离获得的菌株分别免疫家兔，制备抗血清，做交互凝集试验。 

    Dienes试验：将不同标本中分离获得的菌株分别点种在表面干燥的普通营养琼脂平板或血琼脂平板上，以37℃培养18-24小时观察结果，如果两株菌落互相融合生长，认为是相同的菌株。如果两株菌落之间出现明显的分界线，说明是不同菌株。

    抗蔓延试验：将菌株免疫家兔获得抗血清，然后按一定的比例将抗血清加入于已融化并冷却约56℃的琼脂培养基中，混合均匀，倾注平板。待凝固后分别点种于平板上，37℃培养18-24小时。如果形成单个菌落，说明该菌株与制备抗血清的菌株是相同的。 

    双份血清定量疑集试验：将分离获得的菌株做成适当浓度（约1010/ml）的菌液，然后分别与患者发病初期（1-3天）与恢复期（12-15天）的双份血清，进行试管定量疑集试验，恢复期血清的疑集价有4倍或以上的增加具有流行病学意义。 

2．流行病学分型技术

    血清分型：用已知的标准血清进行血清分型，从患者分离获得的菌株与其他标本获得的菌株应属于同一血清型。 

    噬菌体分型：从污水中分离的变形杆菌菌株中获得的温和噬菌体可以裂解普通变形、奇异变形杆菌，并可以分型。 

    变形杆菌脉冲场电泳（PFGE）分子分型：Sabbuba（2003年）用NotI-PFGE技术对医院环境和病人的54株奇异变形杆菌进行分型，有52株可分为不同的脉冲型，并于经典的Dienes分型法进行了比较，NotI-PFGE技术有更强的区分能力。

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