植物组织培养之污染与检测（三）

三、污染种类的鉴定方式

1. 针对培养难易菌种鉴定方式

A. 针对易培养的菌种：其种类为真菌，细菌

a.就真菌而言，主要是利用显微镜，视其孢子形态、产孢结构、及菌丝有无隔膜、还有细胞壁之形成加以鉴定。目前亦有使用DNA探针加以分析。

b.就细菌而言，则是利用其特殊的生化反应，或是利用选择性的培养基。目前亦有如用fatty acid profiling技术和商业化的test kits加以鉴定。

B不易培养的菌种，如菌质体，病毒，类病毒。

a.就菌质体而言，主要是观察其在培养基上菌落的形态。

b.病毒而言，分析其核酸的组成与例子的外形。

类病毒因没有套膜，以上两种常利用其DNA有同源性而做探针侦测。

C.病原菌的侦测

  利用柯霍氏法来测其病源性。而利用分子诊断，如血清、ELISA、DNA序列、核酸的探针以鉴定种类。

2. 鉴定菌种常用的方式与应用的微生物种类

方法                     目标微生物

无种别性

指示培养               所有可培养的细菌

DNA/RNA 萤光染色法         菌质体及有关原核生物

Leaf dip electon microscopy        长条状的病毒，其数目较多者亦适用

电泳                 类病毒

有种别性

ELISA                 细菌及病毒

PALIAS                细菌及病毒

ISEM                  病毒

DNA探针                所有微生物

快速诊断的 kits             细菌

Fatty acid profiling            细菌

3. 一般对细菌的基本测试

a.Gram stain

b.形状

c.游动性

d.催化酵素的测试

e.氧化酵素的测试

f.热稳定性

g.行氧化作用或发酵作用

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