植物组织培养之污染与检测（四）

四、针对污染源常使用的防治方法

A. 种类

1. 热疗－对病毒较有效但须花费时间。处理时，需6-12星期在30-40℃。

2. 冷疗法－亦对病毒有效。

3. 利用抗生素。

4. 以分生组织，不带病毒等污染源。

5. 利用培养基中高糖，高盐的浓度。

6. 利用抗并毒药物。

7. 营养需求不同。

8. 利用水。

9. 抽样检测。

B. 防治方法之效果讨论

1. 热疗法及冷疗法

对病毒有效，但须花时间处理，例如：热疗法处理时间需花6-12星期在30-40℃。

2. 利用抗生素

这是目前较常用的方法，但是在抗生素加入培养基，其有效浓度常因植物具有半渗透功能，而使浓度无法达到有效浓度。使用抗生素时，需注意下列事项：

（1）要知道抑制的微生物为何，再使用抗生素，及对症下药。

（2）要决定最小抑制浓度，以降低成本。

（3）要确定抗生素不会对植物造成并害或突变。

（4）确定抗生素在培养基上是否有作用。

（5）使用时，常因需要而多种混合或交替使用。

（6）有些抗生素在某些国家是禁止使用，使用前必须做询问此药剂是否合法使用。

使用抗生素的缺点

（1）可能对哺乳类动物有害。

（2）若是使用生长期较长的植物，微生物亦有抗药性产生。

（3）容易错误使用：没有针对微生物而使用各种不同的抗生素。

抗生素的种类                            对象

抑制细胞壁合成

Bactracin                  G(+)，杀菌，对抗β-lactams的菌有作用

β-lactams                 G(+)，杀菌，若用10-100倍，则对G(-)有效

Glycopeptides              G(+)，杀菌，但恨贵，不易有抗药性

抑制膜的形成            

plymixins                  对G(-)Psedomonas spp.有效

抑制蛋白质的合成

Ghloramphrnical            杀菌作用，便宜，但对植物有毒害作用

Aminoglycosides            使用对象广泛，对植物有毒害作用，在碱性环境下较有活性可针对G(-)可和盘尼西林(pencillins)一起作用

Macrolides and              对G(+)有静菌作用

Lincosamides

Tetracyclines               为静菌作用，对G(+)、G(-)都可以会刺激酵母菌，植物有害对

核酸抑制物质

Qutnolnes                 杀菌，对 G(+)有效，10-100倍浓度则对G(-)有效，有抗药性产生，可引起过敏反应易

Rifampicin                杀菌，对一些G(+)或G(-)的细菌有作用，但常有抗药性产生

Trimethoprim             对于一些 G(+)或G(-)的细菌有作用，Trimethoprim

Sulphonamides            Sulphonamides两种混合使用有加强的作用

                        Sulphonamides在碱性环境下较活跃

3. 分生组织法

主要是针对在植物内部寄主的菌类，如病毒等。因其生长速度无法长到顶芽的分生组织，所以在顶芽的分生组织则无病原菌存在。可以利用此分生组织培养成植株即可避免感染问题。

4. 利用培养基中高盐或高糖的浓度

在培养基中有一些高盐或高糖的浓度可抑制微生物生长，或有单宁酸的存在时也可以达到抑制效果。

5. 利用抗病毒药物

Ribaririn－对于ssRNA病菌有抑制作用，但是价格昂贵。

6. 营养需求不同

因为不同的菌类其营养需求不同，因此可利用选择性培养基可筛选或抑制一些微生物。

7. 利用水淹

利用水将植株清洗或是完全浸没，以避免其上的接种源四处扩散。

8. 抽样检测

对于后代植株的抽样检测，可将污染严重的个体去除。以上这些方法可以综合使用，以建立一个清洁的植株。

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