植物组织培养之污染与检测（五）

五、污染所造成的结果

1. 生产成本的提高。

2. 对植株造成伤害。

3. 增加接种源及污染的机率。

六、在组织培养过程各个阶段所应注意事项

（1）目前组织培养之流程主要分两种，如下图所示：

在此两种系统中，ModelⅠ和ModelⅡ之比较：

ModelⅠ：先做好一小批产品，再进入量产，此每一单位为一瓶，且自为独立环境，具区隔性，故有污染时所造成的伤害不大。

ModelⅡ：其为大容器系统，一旦有污染，则整批无法避免将会受到污染其培养基多为液体状态。

（2）各阶段注意事项

stage0： 建立干净的植株，以利下面阶段的作业进行。只要建立无菌的植株，则污染的来源便只是来自技术上的失误。因此在此阶段要将病株丢除，并且将其具较多污染源的植株去掉。一般会选择较成熟的植株，因其病征易显现找到植株后。分离其菌或病原菌，做系列稀释以决定浓度。

stageⅠ：在stageⅠ的污染可蔓延培养基，故可利用“视觉”将之选出或丢弃，对于潜伏性或是表现微弱的菌种，需作特别的测试，在此阶段，要对一般的微生物作测试及对已知的病原菌作测试，若两种为负便可进入stageⅡ。stageⅡ要把污染的植株去掉，知道病原菌并重复分生组织的培养。

stageⅡ：在此阶段中，只有无菌的植株可繁殖。假设此植株为无菌，则污染源便来自操作室，故要先丢掉污染后，然后再取样抽检。

stageⅢ：如同stageⅡ。

stageⅣ：对后代植株需取样检查。

七、讨论

　　目前组培苗污染实验所遇到的问题为不易建立植株的干净度，因此无法确定真正的污染源来自何处，无法对症下药。而且对于菌种的鉴定有很大的困难，因为一般有关植物或是植物病原菌，因为有钱人的资料留下，可叫易鉴定。但是对于目前一般在大气中生存的微生物，其背景资料较少，对于鉴定而言，便较棘手。而且目前商业化的test kites一般都是针对人体或是食品方面。对于可应用于植物的test kites太少。且使用ELISA或分子诊断，则因专一性太强，一旦有别种的微生物出现，则造成了无法侦测到而逸出。

 　　由上述这些资料可得知在组织培养的过程中，上流的技术会影响到下流的产量，而污染问题常在整个制造过中占有一定比例。对于如何控制污染，亟欲警系统的建立，和建立一个良好的工作环境，训练素质优良的员工，和干净的植株系统为组培业所要努力的方向。

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