食源性致病菌检测技术（6）

蜡样芽胞杆菌

    导致食源性疾病的蜡样芽胞杆菌可出现两个类型的症状：腹泻综合症与呕吐综合症。多发生在夏秋季（6-10月）最高。往往是食品在食用前保存温度不当，放置时间过长，使污染在食品中的蜡样芽胞杆菌或残存的芽胞得以生长繁殖，而导致食物中毒的发生。 

1．常规分离鉴定技术

    计数培养、增菌培养：按GB/T4789.14-2003的方法进行. 

    肠毒素测定:可采用兔肠结扎试验、血管通透性反应、毒素致死试验、免疫反应检查等方法测定。方法可参见何晓青主编《卫生防疫细菌检验》1989年9月出版。 

    呕吐毒素测定：将含有0.95%氯化钠的米饭，经115℃灭菌15分钟后接种待检菌株，30±1℃培养18-20小时取出，淀粉酶水解，聚乙二醇透析浓缩后，用导管插入猴子或小猫的胃内，如含有呕吐毒素即发生呕吐。 

2．流行病分分型技术

    生化学分型：村上曾将蜡样芽胞杆菌按5项生化分成15个生物型，后 来小佐和Jinbo等又分别用上些生化试验将该菌分成12个生物型和8个生物型。我国吴光生（1984）使用5个生化试验将该菌分成32个生物型。 

    血清学分型：利用蜡样芽胞杆菌H抗原进行分型，国外已有23个型 的诊断血清，引起腹泻综合症菌株的血清型为2、6、8、9、10和12。引起呕吐综合症菌株的血清型为1、3、4和5型。方法可采用标记的SPA菌株试剂作玻片协同凝集试验，确定其血清型。 

    脉冲场凝胶电泳分型Liu等（1997年）用脉冲场凝胶电泳分析的蜡样芽胞杆菌的在小儿科里的一次感染事件。发现SmaI酶给出了PFGE最好的分型结果。SmaI-PFGE能清楚的区别了流行病相关的流行株和不相关株之间的差异。

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