食源性致病菌检测技术（13）

  副溶血性弧菌

    副溶血性弧菌根据菌体O抗原不同，现已有13个血清群。主要引起食物中毒。副溶血性弧菌进入人体后会在消化道内迅速繁殖生长，产生大量的肠毒素。患者会出现剧烈腹痛、腹泻、呕吐和发热，大多数患者会中度脱水。如果抢救不及时，患者会因为严重脱水而有生命危险。 

1．常规分离鉴定技术

    分离、鉴定：粪便、肛拭、呕吐物、可疑中毒食物及相关的容器涂拭物等，采用直接分离与增菌分离进行检测。检测方法参照何晓青（1991年）专著进行。副溶血性弧菌选择性平板采用科玛嘉显色平板，其菌落特征较典型。副溶血性弧菌的定量监测方法。可参照以最大可有数（MPN）方法进行测定。

    副溶血性弧菌鉴定方法包括生化鉴定、小鼠毒力试验、神奈川（KP）试验，KP很可能就是致病菌株。耐热溶血素检测，参照GB/T4789。7-2003，FDA等检验方法，通过以上鉴定技术，确定副溶血性弧菌及其毒力情况。  

    PCR检测技术应用：副溶血性弧菌的耐热溶血素及耐热相关溶血素基因通过PCR扩增，在食源性疾病相关标本中直接检测毒力基因，该方法具有快速简便的特点，为食源性疾病的快速诊断提高有效的依据。检测副溶血性弧菌特有的基因片段（Pr72H）的方法，也可进行鉴定是否为副溶血性弧菌。  

    血清抗体检测：取急性及恢复期双份血清做间接凝血试验：取急性及恢复期双份血清做间接凝血试验，抗体效价呈4倍或以上增长，即可确诊。副溶血性弧菌抗体产生较早，一周之内可有明显升高，以后迅速下降。  

2．流行病学分型技术

    血清分型技术：副溶血性弧菌可分为13个血清群及67个K抗原因子血清型。菌体须以121℃高压灭菌1小时后进行凝集试验，近年来副溶血性弧菌流行的血清型以O3：K6为多见。  

    分子流行病分型技术：目前在副溶血性弧菌分子流行病学采用的方法有：PFGE、多重PCR、核酸体分型以及随机扩增多态性核糖核酸技术（RAPD）等。

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