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分子微生物室检验分析前中后质量控制解析



录入时间:2011-9-20 17:07:10 来源:中国论文下载中心

   【关键词】  实验室技术和方法;质量控制;管理制度

   Quantity Control Analyze of Examination Analysis in Member Microbe Room                    

  Key words:Laboratory technique and method; Quantity control;Manage system

  随着检验医学的迅速发展,检测技术也在不断提高,各大医院都给分子微生物实验室配备了最先进、精密度、准确度最好的全自动荧光定量分析仪。我院从2000年开始配备了由美国PE公司生产的全自动荧光定量分析仪,是由我院的性质决定的。我院为传染病专科医院,工作量大,要求时间短,为确保所测项的准确性而配备的,同时要求分子微生物室操作人员必须经过严格的培训后持有上岗证,才能进行此项操作。此外检验人员还要不断学习新技术,掌握新知识,了解检验医学的新动向,在检测过程中要严格遵守操作规程,提高检验技术水平,防止标本间的交叉污染,以及扩增产物的污染等就显得十分重要,这是做好试验的关键所在。在分析过程中为确保报告单的准确性可分为3个环节:分析前、分析中、分析后,其中哪一个环节都不能忽视。现将整个环节进行解析如下。

  1 加强分析前的质量管理

  1.1 采血器械的标准化 长期以来由于采血器械没有统一的标准,使用存在的不少问题,如软质塑料试管采血,由于污染问题的存在可造成结果不准确,这样大夫在诊断和治疗以及用药方面带来了很多不便,也不可避免的造成了假阳性结果(对乙肝DNA而言),或者是假阴性结果(对丙肝RNA而言)。近年来,我科使用真空采血系统,这样就减少了医务人员在采血过程中的交叉感染,同时也减少了体外溶血的发生而造成的检验结果的误差。

  1.2 按规定时间进行 采血一般建议患者早晨空腹采血,因乳糜血会影响结果的准确性,使结果偏低。在疾病发展过程中,标本的采集过早或过晚都可能会给出假阴性结果。

  1.3 防止标本采血不当造成溶血 标本溶血对RNA的测定有较大影响,如果标本溶血,血细胞破裂会有大量RNAse释放而使提取核酸的模板RNA降解。溶血多由于采血步骤不规范、技术不熟练而造成,如抽血不顺利、抽血时压力过大等。

    1.4 标本送检要及时 采集后的标本应及时送检,由于分子微生物实验室对标本要求比较严格,比如HCVRNA的检测要求标本送检后必须在2 h内分离出血清,如短时间(1周~2周)保存在-20 ℃,长时间保存应在-70 ℃以下。

  1.5 标本确认和申请单的核对 住院和门诊患者都要检查姓名、年龄、开单时间、接标时间、检测项目等逐一进行登记,以免发生标本错误。标本在分离转移时要避免发生错误和交叉污染,标本若发生溶血、脂血等应拒收,然后填写拒收报告单。

  2 注重分析中的质量管理

  2.1 仪器的维护 全自动荧光定量分析仪(PCR仪)属于精密电子仪器,应当在15 ℃~25 ℃之间运行。室温太高或太低都会引起仪器内的程控芯片和其他元件不正常工作。除此之外,要注意室内的湿度,保持室内卫生,避免阳光直射,最好专人使用、维护和保养,PCR仪应定期用电子测温仪校准温度。

  2.2 试剂的准备 所测项目应严格按照试剂盒说明书来进行,分析过程中每加一步试剂都必须认真仔细防止试剂被污染,注意更换吸头,所有操作过程一律都在生物安全柜内进行。试剂一般根据标本用量来进行配制,避免反复冻融。

  2.3 分析过程中质量控制 分子微生物实验室的质量控制主要由室间质控、室内质控来评价,室间主要反映实验室结果的准确性及可比性,室内主要反映实验室的精密度。除此之外,质控物的复溶和保管也是重要的。在发报告单之前要对所测质控值进行分析,看是否在控,如不在控要分析原因,采取纠正措施。

  3 重视分析后的管理

  3.1 管理体系 我院采用微机录入、微机采集、微机审核的管理体系,每份报告结果均由检测者和审核者检查审核后才能发出。在审核过程中对结果有可疑时应进行复查,并通知大夫第2天再报结果。标本检测完后,我室将原标本和血清标本一起保存14 d,以免有疑义时进行复查。

  3.2 结果分析和解释 测定结果与临床诊断不符要进行复查、要及时和临床医生沟通。由于PCR试验受多种因素的影响,应做好解释工作。如果在检测中出现免疫标志与分子生物学标志发生矛盾时,应结合临床的全面情况作出合理的解释。

  参考文献

  [1] 卫生部临床检验中心.98全国临床化学室间质评总结大会专题报告集[R].1998,11.

  [2] 李影林.中华医学检验全书[M].北京:人民卫生出版社,1996,8(9).

  [3] 刘克莉,方宏罡,赵士平.中国误诊学杂志,2006,6(1):170171.

 

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