微生物发酵对溪黄草抑菌效果的影响（2）

3  结果 

　　3.1  微生物发酵对溪黄草抑制细菌生长的影响从表1可知溪黄草对白葡萄球菌的抑制作用比对大肠杆菌的抑制作用明显。表1  发酵溪黄草的抑菌效果（略）   

　　经枯草杆菌发酵和未经枯草杆菌发酵的溪黄草醇提物对细菌都具有一定的抑制作用，其中经枯草杆菌发酵后溪黄草的抑菌效果反而降低。表2结果发现发酵过程中枯草杆菌的生长会受到溪黄草的抑制，另外用溪黄草提取物直接进行平板试验，对枯草杆菌的抑菌直径为5.50 mm，也证实溪黄草对枯草杆菌生长的抑制。但不添加其他营养（I）时枯草杆菌仍然生长，证明枯草杆菌能利用溪黄草成分。枯草杆菌发酵会降低溪黄草的抑菌效果，可能是由于枯草杆菌在发酵过程中分解利用了抑菌有效成分或使抑菌有效成分降解。表2  微生物发酵后的菌落数（略） 

　　从表1可以看出，酵母菌发酵后溪黄草的抑菌效果大大加强，但与乳酸菌不同，酵母菌本身不含抑菌物质，因此发酵后其抑菌物质仍来源于溪黄草。溪黄草对酵母菌生长的抑制作用也比对大肠杆菌和白葡萄球菌的抑制作用强（d＝6.29 mm），因此不论有没有添加培养基，酵母在含溪黄草中培养时基本不增长，但发酵前后可以检测出活酵母菌，说明了在发酵过程中，酵母菌能生长。根据上述结果，认为经酵母菌发酵后溪黄草的抑菌效果增强的主要原因是由于酵母菌存在使溪黄草提取物中抑菌有效成分增加。 

　　3.2  微生物发酵对溪黄草抑制霉菌生长的影响经枯草杆菌、乳酸菌和酵母菌发酵的溪黄草醇提物作用于黑曲霉和青霉菌都没有产生明显的抑菌圈，这和其他文献报道的溪黄草的醇提物对霉菌抑制效果不明显［2］相一致。 

　　经乳酸菌发酵（包括乳酸芽孢杆菌和美乐多乳酸菌）的溪黄草醇提物对照组Ⅲ和Ⅴ在平板培养后，霉菌的生长不铺过滤纸片，而其他在平板培养后有少量的霉菌在滤纸片上生长，说明乳酸菌醇提物对霉菌也有一定抑菌效果。 

　　利用酵母菌发酵的Ⅴ在培养后霉菌铺过了滤纸片生长，Ⅱ和Ⅳ培养后有少量的霉菌在滤纸片上生长，而Ⅰ和Ⅲ培养后霉菌的生长并不铺过滤纸片，这可能同样是酵母菌发酵过程使溪黄草提取物抑菌有效成分浓度更高，使其抑制作用更强。 

　　3.3  纤维素酶处理对溪黄草抑菌作用的影响实验发现溪黄草醇提前先经过纤维素酶处理，其抑制细菌作用较未经酶处理的溪黄草醇提物有较大增强（表3）。当纤维素酶用量增加，溪黄草的醇提物的抑菌作用也随之增强。表3  纤维素酶处理后溪黄草的抑菌效果（略）   

　　实验发现经纤维素酶处理的溪黄草的醇提物对于霉菌（包括黑曲酶和青霉菌）都无明显抑制作用，但是经纤维素酶处理后的溪黄草醇提物，霉菌不覆盖滤纸片生长，而溪黄草的原药醇提物则有少量的霉菌在滤纸片上生长。   

　　添加纤维素酶对溪黄草进行预处理后，纤维素酶起到了破壁作用使得溪黄草的抑菌有效成分能够更容易地溶于乙醇中，从而增强了抑菌效果,这与其他应用纤维素酶提取中药时的效果一致［8，9］。根据结果，进一步推断上述酵母发酵溪黄草使其抑菌作用大大增强是由于酵母起到了破壁作用，使抑菌成分含量增加，同时酵母不会破坏抑菌成分。   

　　纤维素酶是可以由真菌和细菌等微生物在特定的条件下产生，那么利用微生物直接处理中药就可以起到破壁的作用，在大生产中可以降低原料的成本和简化操作。 

　　4  结论   

　　实验结果证实溪黄草对于细菌的抑制效果比较明显，对霉菌有一定的抑制效果。实验结果显示枯草杆菌和乳酸菌不能提高溪黄草抑菌效果，反而会使其抑菌效果下降；酵母菌发酵溪黄草可使其抑菌作用得到明显提高，与用纤维素酶处理效果相似，证明利用合适菌种发酵提高药材有效成分的利用率是可行的。同时，通过试验证实中药材可以为某些菌的生长提供必要的物质，可用于开发利用药渣，充分利用药材资源。

作者：刘志伟 卢彩焕 张晨

【参考文献】

  　　［1］孟艳辉，邓芹英，许 国.溪黄草的化学成分研究(Ⅱ)［J］．天然产物研究与开发，1999，12(3):27.

　　［2］姚勇芳，连晓蔚，朱美娟,等.溪黄草中抑菌物质的提取及抑菌效果的研究［J］.食品科技，2008，1：191.

　　［3］战 宇，宁正祥.溪黄草提取物抑菌效果研究［J］.食品工业科技,2003, 24 (10):61.

　　［4］梁盛年，段志芳，付 莉.溪黄草乙醇提取物的体外抗菌活性测定［J］.食品科技，2003，12:58.

　　［5］段志芳，陈珊珊.溪黄草水提物对杨桃果实的保鲜作用研究［J］.食品工业科技，2007，28（8）：219.

　　［6］陆欣媛，刘松梅，郑春英，等 ，中药发酵研究概况［J］.黑龙江医药，2006，19（6）：469.

　　［7］吴炳新，牛纪江，孙筱林，等，中药发酵制药技术［J］.山东中医杂志，2001，20（3）：179.

　　［8］马田田. 纤维素酶用于中药提取的初步研究［J］.中草药,1994，25(3) :123，139.

［9］田秀兰.纤维素酶在杭白菊总黄酮提取中的应用［J］.齐齐哈尔医学院学报，2005，26（5）:542.

上一篇：微生物发酵对溪黄草抑菌效果的影响（1）

下一篇：除菌过滤器微生物截留的试验分析