植物病毒血清学检测—胶乳凝聚反应

     病毒的抗体吸附在一种与免疫无关的大颗粒表面，然后与相应的抗原结合，出现明显可见的凝聚反应，颗粒可有不同种类，这里介绍致敏胶乳毛细管凝聚反应。

   1.实验材料和用具

    (1)特异性抗体致敏胶乳
    (2)系统感染病毒的植株和健康植株
    (3)0.1M Tris(缓血酸胺)+0.85 ％NaCl缓冲液，pH7.4
    (4)毛细管、研钵、微量离心管、玻片、胶布、台式离心机

  2.实验步骤

    (1)取显症叶片，用缓冲液配成1 ∶10和1 ∶20 的悬浮液，5000转离心5分钟备用，同样方法制备健康对照植物的汁液。
    (2)致敏胶乳用前摇匀，用毛吸管吸取致敏胶乳，约长1cm。
    (3)用已吸取胶乳的毛吸管再吸取病毒悬浮液约长2cm，使抗原与胶乳用量为2 ：1，注意两液之间不能有气泡，同样方法做对照。
    (4)将毛细管按设计顺序排列在玻片上，用胶布条固定，做好标记，并用滤纸吸去管外多余液体。
    (5)在室温下孵育 15-30 分钟，此期间来回颠倒数次，使胶乳和病毒悬浮液充分混合。
    (6)解剖镜或低倍显微镜下观察并记载凝聚物生成情况。

    记录按五级记载：0 －无凝聚物；1－不易辨别的类似凝聚物；2 －凝聚物小而少；3－凝聚物多；4－凝聚物多而大。2 以上为阳性反应。

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