植物病毒血清学检测—玻片沉淀反应

玻片沉淀反应

此方法具有快速、不需要设备和提取免疫球蛋白的优点，但灵敏度不高。

    1.实验材料和用具

    (1)正常血清和抗血清
    (2)系统感染病毒的植株和健康植株
    (3)生理盐水和0.01MPBS缓冲液
    (4)载玻片、玻棒、研钵、微量离心管、饭盒、台式离心机、25oC温箱

    2.实验步骤
    (1)用生理盐水稀释血清为三个浓度：1，1 ∶5，1 ∶10。 
    (2)取1cm  显症叶片，加2mlPBS缓冲液研磨，取汁液，3000转离心2分钟后得悬浮液约为1 ∶10，再配成1 ∶20抗原悬浮液。设置健康对照。
    (3)取洁净载片，两端分别滴加正常血清和抗血清30 μl。
    (4)再滴加等量抗原悬浮液。
    (5)用玻棒搅匀后将玻片放入饭盒保温，在25oC温箱中孵育25-40分钟。

    (6)解剖镜或低倍显微镜中观察沉淀形成并记录结果。

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