真菌学检验标本采集

标本采集Collection of specimens

 (一) 皮屑

(1)需检查的皮损部位在检查前1 周不应使用任何抗真菌药物。

(2) 局部75 % 乙醇(酒精)消毒，轻轻刮取皮屑至载玻片上，滴1 滴5 %~ 10 %氢氧化钾(KOH ) ，盖上盖玻片后置镜下检查。

(3) 取皮屑接种于沙氏琼脂斜面2 管，其中一管加氯霉素和放线菌酮，置25℃ ; 另一管不加抗生素，置37℃ ，培养2-4 周。

(4) 皮屑中最常见的真菌为皮肤癖菌、念珠菌和花斑癣菌，真菌检查阳性即可确定有真菌感染。

（二）甲屑

(1)病甲乙醇消毒后，刮取病甲屑，滴10 %- 20 % KOH 后镜检。

(2) 培养同皮屑。

( 三) 毛发

(1)病发表现为枯黄无光泽或脆易折断。取病发3 - 5 根，滴10 %- 20 % KOH ，轻压后置镜下检查。

(2) 镜检见有发内菌丝，发外孢子或发内孢子为阳性，表示有皮肤癣菌感染。

(3) 培养需取病发5-10 根，方法与皮屑培养同。

（四）脓液

(1) 脓液标本应置无菌广口有盖玻璃瓶或小的无菌平皿中，立即送检。若服液过少，可将脓液置无菌试管中，加2 ml 无菌蒸馏水稀释以防干燥。

(2) 应注意脓液中有无颗粒。

(3) 培养接种沙氏琼脂2 管，一管加氯霉素，置25℃; 另一管不加抗生素，置37℃ ，培养4 周。

(五) 脑脊液

(1)常规腰椎穿刺，取脑脊液3-5 ml ，立即送检，时间不宜超过1 h 。

(2) 脑脊液2 500 r/ min 离心1 5 min。

(3) 无菌吸取离心沉淀物1 ml ，接种沙氏琼脂2 管，同脓液标本。

(4) 取离心沉淀物1 滴作墨汁涂片，发现隐球菌即可确定诊断。应立即通知有关的主管医师，不必等待培养结果，以免延误治疗。

（六）血液

常规使用的细菌肉汤培养基或自动化血培养仪的标准或去抗生素细菌培养瓶，可用于血液真菌培养，或使用脑心浸膏肉汤，置37℃培养4-6 周。培养基混浊或出现菌团表示可能有菌落生长，可挑取镜检并同时移种于沙氏琼脂或其他特殊培养基。

（七） 其他体液

(1)其他体液包括支气管黏液、关节腔积液、心包积液、腹水、胸腔积液、胸膜积液等。

(2) 取10 ml，离心，留约2 ml 沉淀液。

(3) 直接镜检并真菌培养2 管，同脓液标本。

(八) 痰

(1)取晨痰。刷牙后漱口。用力咳出肺部深处痰液，置无菌广口有盖的玻璃瓶中，盖紧，立刻送检。

(2) 标本检查应避开唾液， 取黄色、棕色或带血部分。直接镜检用5 % -10 % KOH 。疑新型隐球菌，用墨汁涂片。

(3) 培养2 管，同脓液标本。

（九）尿

(1)取晨尿。先清洗外阴，留置中段尿。女性以导尿最为理想。置广口无菌玻璃瓶，盖紧立即送检。

(2) 尿液离心后检查。

(3) 直接镜检，培养同脓液标本。

( 十) 粪便

(1)应挑取有脓血或粘液的粪便，置无菌有盖纸盒中立刻送检。

(2) 挑取困难者可取直肠拭子2 支，加1 ml 无菌蒸馏水，置有塞试管中，立刻送检。

(3) 镜检和培养同脓液标本。

（十一） 骨髓

(1)骨髓标本不作常规采用。仅用于高度疑似播散性组织胞浆菌病、播散性马尼菲青霉病或其他播散性真菌感染。

(2) 骨髓取材常规使用含抗凝剂注射液抽取骨髓0.5~ lml ，接种沙氏琼脂2 管。一管加氯霉素，置25℃；另一管不加抗生素，置37℃培养4 ~ 6 周。

(3) 直接镜检应染色，用嗜银染色(GMS) 或Wright 染色(组织胞浆菌病) 。

（十二） 拭子

(1) 用于采集口腔、咽喉、外耳道、阴道和直肠黏膜标本。

(2) 使用2 ~3 根，不能单根。

(3) 拭子至取材部位旋转数次并稍加压，完毕后放入内装1 ~2 ml 无菌蒸馏水试管，塞好棉塞或盖好，立即送检。

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