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实验 马丁氏培养基的制备


录入时间:2011-12-21 10:42:15 来源:互联网

 

     一、目的要求

     通过对分离真菌用的马丁氏(Martin)培养基配制,掌握对选择培养基的配制方法,并明确选择的原理。

     二、基本原理

     马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4MgSO47H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose Bengal)和链霉素等组成。其中葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,KH2PO4MgSO47H2O作为无机盐,为微生物提供钾、磷和镁离子。而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂,对真菌无抑制作用,因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长,从而达到分离真菌的目的。

     马丁氏培养基配方如下:

     KH2PO4 1g

     MgSO47H2O 05g

     蛋白胨 5g

     葡萄糖 10g

     琼脂 1520g

     1000ml

     pH 自然

     此培养液1000ml1%孟加拉红水溶液33ml。临用时每100ml培养基中加1%链霉素液03ml

     三、器材

     KH2PO4MgSO47H2O,蛋白胨,葡萄糖,琼脂,孟加拉红,链霉素;

     试管,三角烧瓶,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅等。

     四、操作步骤

     1.称量和溶化

     按培养基配方,准确称取各成分,并将各成分依次溶化在少于所需要的水量中。待各成分完全溶化后,补足水分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的溶液,在1000ml培养液中加入1%的孟加拉红溶液33ml,混匀后,加入琼脂加热溶化(方法同实验十九)。

     2.分装、加塞、包扎、灭菌,无菌检查与实验十九相同。

     3.链霉素的加入

     由于链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基溶化后待温度降至45℃左右时才能加入。可先将链霉素配成1%的溶液,在100ml培养基中加1%链霉素液03ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg

     五、实验报告

     思考题

     1)什么是选择培养基?它在微生物学工作中有何重要性?

     2)培养细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的最适pH值各为多少?

 

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