植物组培茎段培养

录入时间:2011-12-28 9:55:54 来源：互联网

概念：指不带芽和带1个以上定芽或不定芽的，包括块茎、球茎在内的幼茎切段的无菌培养。

培养目的：快速繁殖。也可研究茎细胞的生理，以及筛选突变体育种。

快繁优点：培养技术简单易行，繁殖速度较快；芽生芽方式增殖的苗木质量好，且无病，性状均一；解决不能用种子繁殖植物的快速繁殖问题等。

1．材料选择和处理

取生长健壮无病虫的幼嫩枝条或鳞茎盘，木本则取当年生嫩枝或一年生枝条,剪去叶片，剪成3～4cm的小段。

注意：1）尽力取顶部茎切段和顶芽，但由于顶芽少可利用腋芽，但尽力用茎上部的腋芽。2）尽量在生长期取芽，休眠期成活率降低。如苹果在3～6月取材的成活率为60%，7～11月下降到10%，12～2月都在10%以下。

在自来水中冲洗1～3小时，用75%酒精灭菌30～60秒，再用0.1%升汞浸泡3～8分钟，或用饱和漂白粉浸泡10～20分钟，因材料老嫩和蜡质多少而定时间。最后用无菌水冲洗数次，以备接种。

2．培养选MS培养基，加入3%蔗糖，用0.7%的琼脂固化。培养条件保持25℃左右，给予充分的光照和光期。

培养物的变化：1）基部切口上长出愈伤组织，呈现稍许增大，控制不要过大。2）而芽开始长长，有时会出现丛生芽，培养方式或是培养出芽梢或是培养芽丛，从而得到无菌苗。

培养基：促进腋芽增殖用6-BA是最为有效的，依次为Kt和Zt等。生长素虽不能促进腋芽增殖，但可改善苗的生长，也要适量加入。GA对芽伸长有促进作用。

继代扩繁：包括二种途径，一是促进腋芽的快速生长，二是诱导形成大量不定芽。第一种途径的好处是不会产生变异，能保持品种优良特性。且方法简便，可在各种植物上使用，每年从一个芽可增殖10万株以上。第二种途径虽会产生变异，繁殖系数较高，适于多数植物。

生根培养和移栽驯化与茎尖培养相似，不再重复。

同样注意驯化管理。要进行炼苗，小心移栽，初期湿度要大，基质通气湿润，保湿保温，特别要精心管理等。