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植物组织培养离体叶培养


录入时间:2011-12-29 9:52:12 来源:互联网

 

 

    离体叶培养包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶在内的叶组织的无菌培养。它大多经脱分化形成愈伤组织,再经再分化生出不定芽和不定根。 

应用:不仅可用于研究形态建成、光合作用、叶绿素形成等理论问题,而且也是繁殖稀有名贵品种的有效手段。 

叶培养特点:材料来源广泛,数量大,容易培养,尤其对木本植物,生成的愈伤组织完整,数量多,较迅速等。 

叶片再生能力: 以羊齿植物最多,双子叶植物次之,单子叶植物最少。 

再生方式:一种是直接诱导形成不定芽,另一种是先诱导形成愈伤组织,再经愈伤组织分化成植株,叶的离体培养技术如下: 

    1.材料选择及灭菌  选择健康洁净的植株,取其较幼嫩叶片,冲洗干净,用70%酒精漂洗约10秒,再在饱和漂白粉液中浸315分钟,或在0.1%升汞中浸35分钟,以前者为佳。用无菌水冲洗数次,再放在无菌的干滤纸上吸干水分,以供接种用。对一些粗糙或带茸毛的叶片要延长灭菌时间。注意要选择成熟的叶片。 

2.接种  将叶片切成约0.5cm见方小块或圆片及薄片(如叶柄和子叶),注意选择切块位置。MS培养基附加BA 13NAA0.251 

3.培养  培养条件为每天1012小时光照,光强15003000Lx 

1培养24周,叶切块开始增厚肿大,进而形成愈伤组织。2)转移到分化培养基上进行培养,其培养基的BA含量为2左右,约再过10天左右,愈伤组织开始转绿出现绿色芽点,形成不定芽。通过继代培养和生根培养,完成整个组培过程。 

叶的培养比胚,茎尖和茎段培养难度大。首先要选用易培养成功的叶组织,如幼叶比成熟叶易培养,子叶比叶片易培养。其次要添加适当的生长素和细胞分裂素浓度,保证利于叶组织的脱分化和再分化。

 

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