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草莓组织培养


录入时间:2011-12-31 9:27:08 来源:互联网

 

    草莓的形态特征和生物学特性 

草莓(Fragaria spp.)为重要的浆果植物,栽培分布很广,其总产量在浆果类中仅次于葡萄,居世界第二位。草莓果实柔软多汁,含丰富的糖、酸、矿物质,维生素等。草莓可鲜食,也可加工成果酱,果酒等。其颜色鲜艳,是良好的配餐食品。 

草莓繁殖容易,结果早,收效快。尤其是近年的促成栽培,利用塑料大棚、日光温室,使草莓的成熟期大大缩短,从每年的11月份到次年的6月份,都有新鲜草莓上市,填补了水果的淡季市场。 

1)形态特征 草莓属多年生草本植物,植株矮小,呈半平卧丛状生长,根系为须根系,在土壤中分布较浅。草莓的茎呈短缩状,分地上和地下部分,地上短缩茎节间极短,节密集,其上密集轮生叶片,叶腋部位着生腋芽。地下短缩茎为多年生,是贮存营养物质的器官,也可发育成不定根。匍匐茎是草莓的特殊地上茎,是其营养繁殖器官,茎细,节间长,一般座果后期发生。叶属于基生三出复叶,呈螺旋状排列,在当年生新茎上总叶柄部与新茎连接部分,有两片托叶顶端膨大,圆锥形且肉质化。离生雄蕊2035枚。雌蕊离生,呈螺旋状排列在花托上,数目从60600不等。花序为二歧聚伞花序至多歧聚伞花序。果实为假果,主要是花托膨大肉质化形成,瘦果以聚合果形式生于花托上。果实成熟时果肉红色,粉红色或白色。 

2)生物学特性 草莓根系在土壤温度达到2℃时开始活动,在10℃时开始形成新根,根系生长的最适温度为1520℃,秋季温度降低到78℃时生长减弱。春季气温达5℃时植株开始萌芽,茎叶开始生长。草莓是喜光植物,但又比较耐荫。光照充足,植物生长旺盛,叶片颜色深,花芽发育好,能获得较高的产量。相反光照不良,植株生长势弱,叶柄及花序柄细。叶片色浅,花朵小,果实小,着色不良。草莓的根系分布较浅,加上植株矮小,而叶片则较大,因此蒸发量大。在整个生长季节,叶片几乎都在不断地进行老叶死亡、新叶发生的过程,叶片更新频繁。这些特点,决定了草莓对水分要求较高。但在不同的生长发育时期,对水分的要求不同。开花期土壤的含水量应不低于最大田间持水量的70%。果实膨大及成熟期土壤含水量应不低于80%,而秋季910月份,土壤持水量达60%即可,草莓不耐涝,要求土壤既有充足的水分供应,又要有良好的通气条件。草莓对土壤适应性强,在各种土壤上都能生长。但由于是浅根性作物,要求肥沃、疏松、透水、通气的中性、微酸性或微碱性土壤。 

栽培方法 

在自然条件下,草莓用匍匐茎分株法繁殖,这种方法繁殖系数高,保持了母本的优良性状。在繁殖圃设1m宽行距,5060cm株距定植,从5月到9月均可繁殖。圃内保证肥水供应,保持土壤湿润、疏松,减少结果量。匍匐茎发生后,将其向母株四周拉开,排列均匀,并在偶数节上压土促发根系,每条匍匐茎上可形成35个壮实的子幼苗,待茎苗长到34片叶时可以移出,作为定植苗用。移出时每株小苗靠母株一侧的匍匐茎留2cm长剪断,另一侧齐根剪断。起出的苗可进行假植,假植宽度以15×15cm为宜,假植深度以根和叶柄分界线埋入土壤1cm为宜,假植后要做好管理工作。

 

草莓的脱毒苗培养

1)热处理脱毒

将草莓植株在4041℃温度下处理46周,然后取微茎尖培养。

2)微茎尖脱毒 

①初代培养 取草莓生长健壮的母株或匍匐茎上的顶芽,用自来水流水冲洗24h,然后剥去外层叶片,在无菌条件下,用0.5%次氯酸钠溶液表面消毒5min,并不停地搅动促进药液的渗透。在无菌条件和解剖显微镜下剥取茎尖分生组织,以带有1个叶原基的茎尖为好。0.2mm的茎尖无病毒率可达到100%,但接种后的成活率下降,并延长培养时间。茎尖分离后,迅速接入培养基MS+BA0.25+NAA0.25White+IAA0.1中。培养条件为2225℃,日照1618h/d,光强3000Lx。经23个月的培养,可生长分化出芽丛,一般每簇芽丛含2030个小芽为适。注意在低温和短日照下,茎尖有可能进入休眠,所以较高的温度和充足的光照时间必须保证。 

②继代培养 把芽丛割成芽丛小块,转入MS培养基中,令其长大,以利分株,待苗长大到12cm时,可将芽丛小块分成单株,再转入前述的分化培养基中,又会重复上述过程,达到扩大繁殖的目的。 

③生根培养 在培养基中加入NAA 1mg/LIBA 1mg/L使发根整齐,由于草莓地下部分生长加快,发根力较强,也可将具有两片以上正常叶的新茎从试管中取出进行试管外生根。 

④驯化 用镊子把草莓苗从试管瓶中取出,洗掉根系附带的琼脂培养基。事先备好8×8cm6×6cm的塑料营养钵,内装等量的腐殖土和河砂。栽前压实,浇透水,用竹签在钵中央打一小孔,将试管苗插入其中,压实苗基部周围基质,栽后轻浇薄水,以利幼苗基部和基质密合。 

栽后的试管苗要培养在湿度较大的空间内,一般加设小拱棚保湿,并经常浇水,以增加棚内湿度,以见到塑料薄膜内表面分布均匀的小水珠为宜。约过710d 后。当检查有一定的根系生出,可逐渐降低湿度和土壤含水量,进入正常幼苗的生长发育管理阶段。 

 花药(Pollen)培养 

花药培养操作简单,因经愈伤组织途径,再分化得到的即为无病毒苗,所以可免去病毒鉴定工作。 

1)取材与培养

取花粉发育单核期的花蕾,置于洁净培养皿中,内放一层滤纸,滴蒸馏水数滴保湿。将处理放入34℃冰箱中低温保存34d。经预处理的花蕾先在70%酒精中浸泡半分钟,取出放入新配制的饱和漂白粉上清液中消毒10min,用无菌水冲冼3次。然后在超净工作台上剥取花药,立即接种。花粉发育时期可采用醋酸洋红压片签定,培养基为MS+2.4D 0.4 +IAA2。去分化阶段培养条件为2426℃,10h/d,1500Lx20d后可产生乳白色的愈伤组织。 

2)植株分化 

将诱导出的花药愈伤组织转移至1/2 MS基本培养基中,添加GA 0.5BA 0.5和三十烷醇4mg/L。愈伤组织经培养后很快转绿,以后微带淡紫红色,15d后在表面分化出半球形小突起,转为绿色。20天后分化出幼叶、幼茎,并有不少突起物,以后陆续分化出新梢。   

草莓无病毒苗的鉴定Identification 

草莓花药培养得到的为无病毒苗,而用生长点培养得到的植株,则必须经过病毒鉴定,确定其不带病毒,才可以大量繁殖,用于生产。 

1)草莓病毒的种类 

草莓病毒主要有四种,为斑驳病毒,皱叶病毒,脉结病毒和轻型黄边病毒。斑驳病毒在EMC指示植物上表现不整齐的黄色小斑点;皱叶病毒在指示植物UC1上产生不整齐的小斑点,以及不整齐的叶脉,叶柄暗褐色;脉结病毒在指示植物EMC上表现小叶向后反转成风车状,尖端卷曲,叶脉成带状褪绿;轻型黄边病毒在EMC指示植物产生红叶,数日即枯。 

2)草莓病毒的鉴定方法 

因草莓的病毒在通过汁液接种时不感染,所以通常采用小叶嫁接法来进行鉴定。 

首先从被鉴定的草莓上采集长成不久的新叶,除去两边的小叶,中央的小叶带11.5cm的叶柄,把它削成楔形作接穗。而指示植物则除去中间的小叶,在叶柄的中央用刀切入11.5cm,再插入接穗,用线把接合部位包扎好。为了防止干燥,在接合部位涂上少量的凡士林。为保证成活,在二周内,可罩上塑料袋,置于半见光的场所。约经两周时间,撤去塑料袋。若带有病毒,嫁接后12个月,在新展开的叶、匍匐茎或老叶上会出现病症。

草莓无病毒苗的繁殖和利用(Propagation and Utilization) 

1)防止蚜虫的危害 

草莓无病毒苗的繁殖重要的是要防止无病毒苗的再度污染。由于草莓病毒主要是蚜虫传播的,所以要搞好防蚜虫工作。传播草莓病毒的主要有草莓茎蚜、桃蚜和棉蚜。其中分布最广泛的是草莓茎蚜,茎蚜的身体着生有钉状的毛,可以寄生在寄主的全株各个部位上。一草一木防治时可使用马拉松乳剂,氧化乐果乳剂等接触杀虫剂,防治期在56月和910月,特别是910月一次,可防止蚜虫的越冬。     

为保证种苗的无病毒,在原种种苗生产阶段,应在隔离网室中进行。传播草莓病毒的蚜虫较小,可以通过大于1mm网眼,故应采用0.40.5mm大小的规格,其中以300号防虫网为好。 

2)繁殖程序及提高繁殖率的措施 

草莓无毒苗的繁殖程序可分五步,包括病毒鉴定生产出无毒苗、原种种苗培养、原种种苗繁殖、良种种苗繁殖,生产用苗繁殖和栽培苗繁殖,前四步在隔离室中进行,后一步露地进行。为提高无病毒母株的繁殖株数可采用赤霉素处理和摘蕾的方法。赤霉素处理用5ppm的浓度,每株5ml,在5月上旬和6月上旬分两次进行。摘蕾可减轻母株的营养负担,促使匍匐茎的大量发生,田间地每一株可繁殖150200株。 

3)生产管理工作 

 母株必须保证每株有大于3.3m2的营养面积。再是注意匍匐茎排列位置,不要交错重叠,不利采苗,采苗也要适时进行。无论秋季或春季种植,繁殖床必须要进行土壤消毒,小面积可用蒸气剂料混合消毒,可防治草莓萎缩病、根腐病、萎凋病等的发生。 

隔离繁殖圃通常施缓效性肥料,每公亩用3t肥;为促使匍匐茎发生,要经常灌水。

 

 

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